刘富兵，尹 力，徐 珊，张 超，朱昭琼

    (1.遵义医学院 研究生院，贵州 遵义 563099；2.贵州省麻醉与器官保护重点实验室，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    异氟醚对老年大鼠脑皮层和海马神经元凋亡的影响*

    刘富兵1，尹力2，徐珊2，张超2，朱昭琼2

    (1.遵义医学院 研究生院，贵州 遵义563099；2.贵州省麻醉与器官保护重点实验室，贵州 遵义563099)

    目的 检测老年大鼠吸入异氟醚后多个时间点海马不同脑区神经元凋亡的程度，分析异氟醚的致神经元凋亡作用是否随脑区变化。方法 36只健康SD大鼠，雄性，体重300～400 g，随机分为空白对照组、氧气组、苏醒后2 h组、苏醒后1 d组、苏醒后3 d组、苏醒后7 d组，每组6只。除空白对照组和氧气组外，余各组大鼠吸入2%异氟醚30 min。利用Morris水迷宫记录分析系统检测各组大鼠不同时间点的行为改变， TUNEL技术观察海马内皮层、CA1和CA3区神经细胞凋亡水平。结果 苏醒后2 h组大鼠的学习记忆能力出现明显下降(P1 材料与方法

    1.1一般资料动物为SPF级健康雄性SD大鼠，鼠龄15月，体重300～400 g。饲养于遵义医学院生物实验中心(许可证号：scxk渝2007-0005)。

    1.2试剂与仪器异氟醚(山东鲁南制药集团，批号100401)，TUNEL试剂盒(上海罗氏制药有限公司)；DAB显色试剂盒(武汉BOSTER公司)；PBS(武汉BOSTER公司)。

    Morris水迷宫系统(成都泰盟科技有限公司，型号MT-200)；麻醉机(上海德尔格医疗设备有限公司，Drager Julian)和气体监测仪(上海德尔格医疗设备有限公司)；细胞图像分析系统(德国Leica公司，DMLB2HC)；切片机(德国Leica公司，RM2230)。

    1.3实验方法

    1.3.1分组及给药方法空白对照组(Control，n=6)：空气环境中自由活动30 min;氧气组(O2，n = 6)：密封麻醉盒内吸纯氧30 min；苏醒后2 h组(T1，n=6)、苏醒后1 d组(T2，n=6)、苏醒后3 d组(T3，n=6)和苏醒后7 d组(T4，n=6)均于密封麻醉盒吸入2%异氟醚30 min。

    1.3.2Morris水迷宫模型建立大鼠Morris水迷宫为一直径120 cm，高60 cm的圆形水池，将水池分为4个象限，在任一象限放入平台，平台直径15 cm，高30 cm，加水并使水面高过平台2～3 cm ......