刘蒙蒙，孙小杰，周正平，肖 欣，袁 丹

    (1.遵义医学院 病理学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 医学与生物学研究中心电镜室，贵州 遵义 563099)

    临床医学研究

    雌激素对人子宫内膜样癌JEC细胞中ERα、ERβ及p57kip2表达的影响*

    刘蒙蒙1，孙小杰1，周正平2，肖欣2，袁丹1

    (1.遵义医学院病理学教研室，贵州 遵义563099；2.遵义医学院 医学与生物学研究中心电镜室，贵州 遵义563099)

    目的 研究雌激素干扰人子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma ,EC)JEC细胞后雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型ERα、ERβ及p57kip2在细胞中的表达变化。方法 分别用含有3种不同浓度的雌二醇(β-Estradiol, E2)(10-6mol/L,10-8mol/L,10-10mol/L)的培养基进行JEC细胞的体外培养，用不含药物的培养基进行培养，作为对照，于培养24、48、72h后，用光镜及电镜观察E2干扰后JEC细胞的形态改变，用MTT法检测JEC细胞的增殖情况，用Western Blot (WB)法检测JEC细胞中ERα、ERβ、p57kip2蛋白的表达情况。结果 形态改变及增殖情况：E2浓度较低时可促进JEC细胞的生长(P1 材料与方法

    1.1细胞株人子宫内膜样癌中分化JEC细胞株由遵义医学院微生物教研室提供。

    1.2试剂雌二醇购自北京华迈科公司，MTT相关试剂购自南京凯基公司， p57kip2、ERα、ERβ鼠抗人单克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司，鼠抗人β-actin单克隆抗体及WB有关试剂均购自上海碧云天生物研究所。

    1.3仪器倒置显微镜DM4000B(德国Leica公司)，透射电子显微镜H-7650(日本日立公司)，WB相关仪器(BIO-RAD公司)。

    1.4方法

    1.4.1细胞培养及药物分组用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基，在37 ℃、5%CO2、饱和湿度条件下体外培养JEC细胞。取对数生长期的细胞，分别用含有3种不同浓度E2(10-6mol/L,10-8mol/L,10-10mol/L)的培养基进行JEC细胞的体外培养，另取一组不加E2的细胞作为对照组，分别培养24、48、72、96 h后进行后续实验，所有实验均重复3次。

    1.4.2MTT法观察细胞生长情况96孔板培养细胞后，PBS冲洗各孔，每孔加20 μL MTT ......