王文娟，郑 丹，刘 彬

    (1.成都市妇女儿童中心医院 检验科，四川 成都 610014；2.广汉市人民医院 检验科，四川 广汉 618300；3.广汉市人民医院 肝胆科，四川 广汉 618300)

    临床经验交流

    结合型胆汁酸对胆管癌的诊断价值

    王文娟1，郑丹2，刘彬3

    (1.成都市妇女儿童中心医院 检验科，四川 成都610014；2.广汉市人民医院 检验科，四川 广汉618300；3.广汉市人民医院 肝胆科，四川 广汉618300)

    目的 探讨胆汁酸代谢的改变对胆管癌的诊断价值。方法 采用反向高效液相色谱紫外检测法(RP-HPLC-UV)分别测定15例胆管癌患者、38例胆结石患者以及21例无胆道疾病的腹部外伤患者胆汁中9种结合型胆汁酸浓度。结果 胆管癌组胆汁中甘氨胆酸(GCA)和甘氨鹅脱氧胆酸(GDCA)明显高于胆结石组和对照组(P1 对象与方法

    1.1研究对象广汉市人民医院肝胆科2014年3月至2015年5月收治胆结石患者38例(男14例，女24例)，年龄(50.50±18.74)岁，为B超和/或腹部CT检查确诊并排除其他消化道疾病患者；胆管癌15例(男6例，女9例)，年龄(55.00±10.42)岁，为病理学确诊并排除其他消化道肿瘤患者；对照组21例(男12例，女9例)，年龄(46.30±10.52)岁，为无肝胆疾病的腹部外伤患者。

    1.2方法胆汁样本通过外科手术或ERCP获得，采集后立即-80℃冻存。胆汁测定方法采用预先建立起来的固相萃取-高效液相色谱-紫外检测法[4]，用此法测定胆汁中牛磺熊脱氧胆酸(TUDCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨胆酸(GCA)、甘氨石胆酸(GLCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)、牛磺脱氧胆酸(TDCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)、甘氨脱氧胆酸(GDCA)和牛磺石胆酸(TLCA)9种结合型胆汁酸。

    1.2.1色谱条件色谱仪为Shimadzu 2010高效液相色谱仪(日本Shimadzu公司)，色谱柱为Waters Nova C18柱(3.9 mm×150 mm,5 μm)，流动相为甲醇-60 mmol/L磷酸盐缓冲液(66∶34，v/v)，pH 3.3，等度洗脱，柱温25℃，流速0.8 mL/min；检测波长197 nm，进样量为10 μL。

    1.2.2样品预处理方法取胆汁20 μL,加入5 mL/L甲酸溶液1 mL，旋涡震荡混匀后加至已活化的固相萃取C18小柱上(预先用甲醇1 mL和5 mL/L甲酸溶液1 mL依次活化C18小柱) ......