王 敏，林 茂，马晓莉，王宇婷，邵楚莹，杜飞嫦，潘伟明，魏 培

    (1.广东医科大学 分子诊断重点实验室，广东 东莞 523808；2.遵义医学院 珠海校区药学教研室，广东 珠海 519041；3.遵义医学院 珠海校区生理学教研室，广东 珠海 519041；4.广东医科大学 医学检验学院，广东 东莞 523808)

    基础医学研究

    和厚朴酚对人神经胶质瘤U87细胞的体内外抗肿瘤作用

    王 敏1,2，林 茂3，马晓莉4，王宇婷4，邵楚莹4，杜飞嫦4，潘伟明4，魏 培1

    (1.广东医科大学 分子诊断重点实验室，广东 东莞 523808；2.遵义医学院 珠海校区药学教研室，广东 珠海 519041；3.遵义医学院 珠海校区生理学教研室，广东 珠海 519041；4.广东医科大学 医学检验学院，广东 东莞 523808)

    目的 探讨和厚朴酚对U87人神经胶质瘤的体内外抑制作用。方法 CCK8法及克隆形成实验检测和厚朴酚对U87细胞的增殖抑制，DAPI染色及caspase 3活性试验检测和厚朴酚对肿瘤细胞凋亡的影响。建立裸小鼠移植瘤模型，连续腹腔注射给药，通过计算肿瘤体积评价和厚朴酚体内抑瘤效果，免疫组化检测EGFR和mTOR的表达。结果 细胞实验显示，与对照组相比，和厚朴酚处理组U87细胞增殖减慢，细胞克隆形成能力下降，细胞凋亡率升高，caspase 3活性增强 (P1 材料与方法

    1.1 细胞和试剂 人神经胶质瘤U87细胞株购自南京恩晶生物公司；DMEM培养基及胎牛血清购自美国Gibco公司；CCK-8细胞增殖试剂盒和Caspase 3分光光度法检测试剂盒购自海门碧云天生物公司；和厚朴酚(溶于乙醇，PBS稀释)购自大连美仑生物公司；EGFR抗体和mTOR抗体购自四正柏生物公司；鼠/兔免疫组化试剂盒购自长沙艾佳生物公司；4～6周龄BALB/c裸小鼠，体质量19～22 g，许可证号SCXK(粤)2013-0008，购自南方医科大学实验动物中心；其它试剂均为分析纯。

    1.2 细胞培养 人神经胶质瘤U87细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM中，在37 °C、5% CO2的饱和湿度培养箱中常规培养。细胞生长至密度约80%时，0.25%的胰蛋白酶消化传代并经台盼蓝染色计数，所有实验均采用对数生长期细胞。

    1.3 细胞增殖检测 对数生长期细胞以2×103/孔密度接种96孔板，37 °C、5% CO2的饱和湿度培养箱中过夜培养。随后不同浓度的和厚朴酚(0、15、30、50 μmol/L ......