惠 景，李晓飞，朱欣婷，姜胜男，晏 容，范 芳，刘 云

    (1.遵义医学院 贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治重点实验室，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 基础医学院生化教研室，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    3种斑蝥素碱土金属盐类衍生物对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用

    惠 景1,2，李晓飞1,2，朱欣婷1,2，姜胜男2，晏 容1,2，范 芳1,2，刘 云1

    (1.遵义医学院 贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治重点实验室，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 基础医学院生化教研室，贵州 遵义 563099)

    目的 比较3种斑蝥素碱土金属盐类衍生物对人肝癌细胞HepG2的抑制增殖及促凋亡作用。方法 采用3种斑蝥素盐类衍生物分别对体外培养的肝癌细胞HepG2进行干预，磺酰罗丹明染色法(SRB 法)检测细胞增殖抑制作用；相差显微镜结合Hoechst33342染色观察细胞形态学变化；流式细胞技术检测细胞凋亡。结果 3种斑蝥素盐类衍生物均呈浓度依赖性抑制人肝癌细胞HepG2的生长，尤以斑蝥素酸镁的抑制效应最强(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物 斑蝥素酸镁由自制斑蝥素合成，制备方法已授权国家发明专利[15]，斑蝥素酸钙、斑蝥素酸锶的合成方法参考斑蝥素酸镁完成。细胞实验前，先用去离子水将上述3种衍生物分别配置成1.2 mg/mL的母液备用。

    1.1.2 肝癌细胞株 人肝癌细胞HepG2购于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。

    1.1.3 试剂 磺酰罗丹明(SRB)购自美国Sigma公司；RPMI-1640培养基、南美胎牛血清和胰蛋白酶购自美国HYCLONE公司；AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒、Hoechst33342染液为碧云天生物技术有限公司产品。

    1.1.4 主要仪器 3131型CO2培养箱和Multiskanspectrum全波长酶标仪购于美国Thermo公司；NikonYS100显微镜购于日本Nikon公司；FACS Calibur流式细胞仪购于美国BD公司。

    1.2 方法

    1.2.1 肝癌细胞的培养 人肝癌HepG2细胞采用RPMI-1640培养基(含10%的南美胎牛血清)在37 ℃、5% CO2和60%的湿度下培养。待细胞生长融合度至80%～90%时，弃去培养液，PBS冲洗2～3遍，用0.25%胰蛋白酶消化后，加培养液吹打均匀，于CO2培养箱中继续传代培养。本研究共分为4个组：分别为对照组 ......