付 浩，杨小飒，余东堃，闫海洋，孙圣凯，陈孝储，程世翔，涂 悦，王志宏

    (1.武警后勤学院附属医院 脑科中心，天津 300162；2.武警8731部队卫生队，广东 广州 510800；3.天津市神经创伤修复重点实验室，天津 300162)

    基础医学研究

    凋亡抑制剂zVAD对脑缺血再灌注小鼠外周血线粒体DNA拷贝数的影响

    付 浩1,3，杨小飒1,3，余东堃2，闫海洋1,3，孙圣凯1，陈孝储1，程世翔1,3，涂 悦1,3，王志宏1

    (1.武警后勤学院附属医院 脑科中心，天津 300162；2.武警8731部队卫生队，广东 广州 510800；3.天津市神经创伤修复重点实验室，天津 300162)

    目的 探讨凋亡抑制剂zVAD对脑缺血再灌注小鼠线粒体DNA拷贝数的影响。方法 80只雄性25～30 g C57BL/6小鼠，随机分为大脑中动脉栓塞(MCAO)模型组(3组共24只)、模型给药组(3组共24只)、假手术组(3组共24只)和对照组(8只)。MCAO模型组应用线栓法，构建小鼠大脑中动脉栓塞模型并在1 h后进行再灌注，模型给药组在再灌注前腹腔注射10 mmol/L的 zVAD 10 mL/kg，假手术组暴露颈内动脉后缝合皮肤，对照组不进行任何操作。分别于再灌注后不同时间点(24、48、72 h)，对经手术操作的每组各8只小鼠进行改良神经功能损伤评分(mNSS)，评分后取血约200 μL并提取外周血基因组DNA，real-time PCR法检测相对线粒体DNA拷贝数。结果 MCAO模型组和模型给药组术后24、48和72 h的mNSS评分均明显高于相应对照组(P0.05)。结论 凋亡抑制剂zVAD对脑缺血再灌注小鼠可起到一定的脑保护作用，这可能由于zVAD抑制了线粒体介导的凋亡通路，并通过端粒—线粒体途径促进了外周血线粒体DNA拷贝数的升高。

    凋亡抑制剂；脑缺血再灌注；线粒体DNA拷贝数；改良神经功能损伤评分

    近些年来，缺血性脑卒中发病率逐年上升，已成为导致我国成人死亡或残疾的主要原因之一，但卒中患者认知功能的转归是高度可变的，若能在早期进行有效干预，对于改善预后至关重要[1-2]。近期有研究发现，线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)拷贝数的变化与脑缺血再灌注小鼠的神经功能损伤症状密切相关，以线粒体为靶点或可改善神经功能损伤症状[3]。N-苯甲基氧化碳酰-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟化丙酮( benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone ......