蛇床子素通过下调TGF-β1信号通路抗野百合碱所致大鼠右心室重构
右室,2结果,3讨论
李叶丽,岳 云,吴雨婷,付 舒,杨丹莉(遵义医学院 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室,贵州 遵义 563099)
基础医学研究
蛇床子素通过下调TGF-β1信号通路抗野百合碱所致大鼠右心室重构
李叶丽,岳 云,吴雨婷,付 舒,杨丹莉
(遵义医学院 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室,贵州 遵义 563099)
目的研究蛇床子素(Ost)对野百合碱(MCT)所致大鼠右心室重构的作用,并探讨其可能的机制。方法200~220 g SD大鼠随机分为正常对照组(Control组,n=8),模型组(Model组,n=8),Ost低、高剂量组(Ost10、Ost20组,10、20 mg/kg,n=8)。除正常对照组外的其余大鼠均经颈背部一次性皮下注射MCT 50 mg/kg复制右心室重构模型,造模后第1天开始给药(ig,qd)。给药28 d后称大鼠体重(BW),右室自由壁重量(RV),计算右室相对质量(RV/BW);通过HE染色观察右心室显微结构;透射电镜观察右心室超微结构;Western blot 检测右心室转化生长因子(TGF-β1)蛋白的表达;real time RT-PCR检测右心室结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(Fn)mRNA的表达。结果与Control组相比,Model组大鼠右室相对质量明显升高(P1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠购自第三军医大学大坪医院实验动物中心,雄性,SPF级, 200~220 g,许可证号:SCXK(渝)2012-0005。
1.2 主要试剂 Ost(纯度≥98%,南京泽朗医药科技有限公司);MCT(美国Sigma公司);BCA蛋白浓度测定试剂盒、ECL+发光剂(江苏碧云天生物技术研究所);HRP标记的GAPDH抗体(上海康成生物技术有限公司);TGF-β1抗体(美国Abcam公司);HRP标记的二抗(英国CST公司);RNA 逆转录试剂盒,荧光混合物,GAPDH、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)引物(TaKaRa 生物工程公司)。
1.3 主要仪器 Olympus BX43光学显微镜及照相系统(日本Olympus);Mini-PROTEAN3电泳仪、Trans-Blot Turbo转印系统、CCD成像系统、real time RT-PCR 扩增仪、通用酶标仪(美国BIO-RAD公司);RNA 逆转录仪(德国Eppendorf 公司);透射电子显微镜(TECNAI10; Philips,Eindhoven,The Netherlands) ......
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