陈燕玲，罗 婷，吴秀香，曾洪敏，李海洲，康 毅，庄晓东，凡 栋，王晓玲，黄霜枝

    (1.遵义医学院珠海校区 病理生理学教研室，广东 珠海 519041； 2.中山大学附属第一医院 心血管内科，广东 广州 510080)

    丙酮醛对人肾近端小管上皮细胞损伤的作用及机制

    陈燕玲1，罗 婷1，吴秀香1，曾洪敏1，李海洲1，康 毅1，庄晓东2，凡 栋1，王晓玲1，黄霜枝1

    (1.遵义医学院珠海校区 病理生理学教研室，广东 珠海 519041； 2.中山大学附属第一医院 心血管内科，广东 广州 510080)

    目的探讨丙酮醛对人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的作用及可能机制。方法采用不同浓度的丙酮醛(100、200、400、800、1 600 μmol/L)处理HK-2细胞24 h后，应用CCK-8法检测HK-2细胞的存活率；罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位；DAPI染色法观察HK-2细胞凋亡形态学变化。Western blot法检测HK-2细胞内磷酸化ERK1/2(phosphated ERK1/2,p-ERK1/2) 、Bax及cleaved- caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组相比，不同的浓度的丙酮醛均能降低HK-2细胞存活率(Plt;0.01)；且HK-2细胞经丙酮醛诱导后cleaved-caspase-3(Plt;0.01)、Bax及p-ERK1/2蛋白表达水平均明显增高(Plt;0.05)。结论丙酮醛能诱导HK-2细胞出现明显的损伤及凋亡，其机制可能与其激活ERK1/2信号通路有关。

    丙酮醛；凋亡；HK-2细胞；ERK1/2

    糖尿病患者若血糖控制不理想，可导致多种并发症出现，其中最常见的慢性并发症为糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)[1]。DN主要表现为高血压、蛋白尿和肾功能不全[2]。糖尿病肾病涉及多种复杂的发病机制，包括糖脂代谢异常、肾脏血流动力学改变、炎症物质及细胞因子的异常表达[3]。近年来，从糖代谢紊乱(糖基化终末产物的形成)角度探讨糖尿病肾病的发病机制越来越受到研究者的青睐[4]。丙酮醛(methylglyoxal,MG)作为糖基化终末产物的前体[5]，是一种高活性的α-二羰基化合物，在糖尿病时明显升高，与多种糖尿病相关的组织细胞损伤密切相关，是糖尿病并发症发生的关键环节[6-7]。因此，本研究选用MG来观察其对HK-2细胞的直接影响，探讨糖尿病肾病时肾脏损伤的可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 ......