白建伟，王 峰，潘 鸿，赵 兰，粟立羽，李 岩

    (1.遵义医学院 公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 公共卫生学院预防医学教研室，贵州 遵义 563099；3.遵义医学院 公共卫生学院食品与营养学教研室，贵州 遵义 563099；4.遵义医学院 公共卫生学院卫生毒理学教研室，贵州 遵义 563099)

    绿原酸是从中药、果蔬等物质中提取的一种天然的多酚类化合物，具有抗炎、抗氧化、抗菌和抗肿瘤等作用[1-2]。绿原酸能有效抑制结肠癌、肺癌、肝癌等癌细胞的生长，抑制作用与剂量无依赖性[3-4]，目前尚不清楚绿原酸对胃癌细胞是否也有抑制作用。刘洁等[4]研究发现，绿原酸对Lewis肺癌移植瘤小鼠和H22肝癌移植瘤小鼠的胸腺、脾脏均无明显影响，这表示绿原酸在发挥抗肿瘤活性的同时并没有对免疫器官产生损伤。绿原酸能通过Caspase依赖性凋亡途径诱导细胞凋亡[5]，但能否通过AIF介导的非Caspase依赖性线粒体途径诱导胃癌细胞凋亡尚不清楚。

    本实验采用不同浓度的绿原酸处理中分化人胃癌SGC-7901细胞，研究绿原酸对SGC-7901细胞增殖的影响，以及不同浓度绿原酸作用于胃癌细胞后，非Caspase依赖途径中凋亡诱导因子AIF的变化，为胃癌治疗提供新的思路和方向。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂与来源 绿原酸(Sigma公司，纯度>95%)，人胃癌SGC-7901细胞株(中国科学院上海细胞所)，DMEM培养基(Hyclone)，胎牛血清FBS(Hyclone)，青链双抗(上海生工)，噻唑蓝(Sigma)，细胞线粒体分离试剂盒(碧云天)，JC-1 探针(碧云天)，Trizol(invitrogen)，PCR引物来源(生工)，SYBRGreen PCR试剂盒(Thermo F-415XL)，逆转录试剂盒(Thermo #K1622)，BCA 蛋白定量试剂盒(凯基)，30%丙烯酰胺(无锡菩禾)，PBS 磷酸盐缓冲液(无锡菩禾)，蛋白预染Marker(Thermo)，PVDF膜(millipore)。

    1.2 方法

    1.2.1 药品配制 称取155 mg的绿原酸粉末溶于1 mL的无水乙醇中，配成终浓度为155 mg/mL的绿原酸母液。使用时，需稀释1 000倍。

    1.2.2 细胞培养 用含10%胎牛血清的DMEM培养基，体外培养人胃癌SGC-7901细胞 ......