朱 蓉，刘振民，邱思芳，张 泉，赵 逵

    (遵义医学院附属医院 消化内科，贵州 遵义 563099)

    结肠癌的发病率及死亡率居高不下，且发病呈年轻化趋势，严重威胁人类的身体健康。但有关结肠癌的发病机制，至今尚未阐明，研究者们也持有不同的观点，其中最经典的即是“正常粘膜—结肠腺瘤—结肠腺癌”途径。近来，随着肿瘤干细胞理论的提出，许多学者认为，归根结底，结肠癌干细胞才是结肠癌的最终起源和根本[1-2]。当结肠癌干细胞分化减少或是异常分化时都将促进结肠癌的发生和进展。已有研究发现在结肠癌的发生进展过程中，杯状细胞的分化改变惯穿了始终[3-4]，粘蛋白 2( Mucin2，MUC2)和肠三叶因子3(Trefoil Factor Family3，TFF3)作为肠杯状细胞重要分化标志物，在结肠腺瘤和腺癌中表达如何，以及与结肠癌的分化、转移等临床病理特征是否存在关联，二者是否可以作为结肠癌的发生发展和转移判断的预测因子，成为了本研究的主旨内容。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 选取遵义医学院附属医院2015年1月至2016年12月经外科手术切除的结肠腺癌标本50例和电子结肠镜活检钳取的腺瘤标本15例以及正常结肠标本10例，均经病理证实。结肠腺癌患者的临床特点为：男26例，女24例；年龄27～85岁，中位63岁， 60岁及以上者27例，小于60岁者23例；有淋巴转移者31例，无淋巴转移者19例；伴远处转移者12例，不伴远处转移者38例；腺癌高分化者14例，中分化者27例，低分化者9例；腺癌TNM分期T1+T2期者9例，T3+T4期者41例；腺癌发生于左半结肠者25例，右半结肠者25例。

    1.2 纳入标准与排除标准 纳入标准：① 肿瘤原发于结肠；②结肠癌患者术前未经任何放化疗及综合治疗等；③完整的临床资料及随访记录。排除标准：①其它部位的肿瘤发生结肠转移者；②结肠黏液腺癌及印戒细胞癌；③ 术前已进行放化疗及综合治疗等；④ 临床资料及随访不完整者。

    1.3 方法 采用免疫组织化学染色法(SP法)检测MUC2和TFF3在各组织标本的表达。标本经10%中性福尔马林液固定，并送至病理科进行石蜡包埋。组织切片(3 μm厚度连续切片)、烤片、脱蜡脱水、3% H2O2抑制内源性过氧化物酶、抗原修复、山羊血清封闭、加一抗(兔抗人MUC2单克隆抗体 1∶200，兔抗人TFF3单克隆抗体 1∶500)、4 ℃过夜、加二抗(抗兔二抗1∶1 000) 、洗涤、DAB显色、苏木素复染、分化、脱水 ......