周 密，欧小波，冉启梅

    (1.遵义医学院珠海校区 临床医学系 ，广东 珠海 519041；2.遵义医学院珠海校区 病理学教研室，广东 珠海 519041)

    近年乳腺癌已成为女性恶性肿瘤死亡的主要原因之一，在我国其发病率和死亡率也呈迅速增长趋势[1]，部分患者往往因就诊不及时导致就医时已发生远处转移，从而大大降低了治愈率。因此，研究乳腺癌细胞转移的相关因素，寻找可能抑制其转移的相关靶点，对乳腺癌的临床治疗十分重要。肝癌缺失基因1(deleted in liver cancer 1,DLC1)由Yuan等在原发性肝癌中首次分离和报道，其作为抑癌基因，在多种恶性肿瘤细胞中表达缺失或减少[2-4]。RhoGAP是DLC1抗肿瘤的主要结构域，而与DLC1分子结构有一定联系的RhoA(ras homologue A)在多种恶性肿瘤细胞中表达增加，且可通过激活Rho蛋白激酶(rho associated coiledcoil-forming protein kinase，ROCK)促进肿瘤细胞侵袭和转移[5-7]，故本研究拟通过免疫细胞化学法和Western Blot实验分别检测DLC1、RhoA在两株不同转移能力乳腺癌细胞株中的表达，探讨DLC1、RhoA对乳腺癌细胞株转移能力的影响。

    1 材料与方法

    1.1细胞株乳腺癌MCF-7细胞及乳腺癌MDA-MB-231细胞株(凯基生物)。

    1.2主要试剂浓缩型DAB及免疫组化染色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)，细胞培养液高糖DMEM和RPMI1640(Gibco)，胎牛血清(四季青)，DLC1antibody(工作浓度为1∶4 000，Gene Tex)，RhoA antibody(工作浓度为1∶500 ......