MEG3对鼻咽癌细胞转移能力的影响及相关机制的初步探究
小室,灰度,载体,1材料与方法,2结果,3讨论
邹 森(攀枝花学院附属医院 耳鼻咽喉科,四川 攀枝花 617000)
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)好发于我国南方,是我国高发的恶性肿瘤之一,据报道2015年我国NPC发病6.06万例,死亡3.41万例,均居耳鼻咽喉恶性肿瘤之首[1],严重影响人们的生命健康安全。多数NPC患者早期无明显特异性症状,易导致病情延误,且NPC细胞颈部淋巴结转移发生较早[2],不利于患者预后,因此,明确NPC细胞侵袭转移的具体机制对NPC的诊治具有重要意义。长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是长度超过200nt的RNA分子,其不编码相应蛋白,但可通过表观遗传、转录及转录后修饰实现对基因表达的调控[3],母系表达基因3(maternally expressed gene3,MEG3)是LncRNA的成员之一,其被发现可影响多种恶性肿瘤的不同恶性行为[4-5],但对NPC细胞的影响尚不清楚,本研究通过慢病毒转染及Transwell实验等体外实验技术,揭示MEG3对NPC细胞侵袭迁移能力的影响,并对可能的相关机制进行初步探究。
1 材料与方法
1.1实验材料实验细胞:包括人鼻咽癌细胞CNE1及人胚肾细胞293T,来自美国模式培养物集存库(American type culture collection,ATCC)。
实验仪器:超净工作台(美国Thermo Scientific ECO1.5),光学显微镜(德国Leica DM1000),高速低温离心机(德国Eppendorf 5424R),超微量分光光度计(美国NanoDrop2000),荧光定量PCR仪(美国ABI 7500),多孔酶标仪、凝胶成像仪(美国Bio-Rad),电泳槽、电泳仪及转印夹等(上海Tanon)。
实验试剂: RPMI-1640、DMEM培养基、胎牛血清、小牛血清(美国Gibco),胰蛋白酶、嘌呤霉素(美国Sigma),质粒抽提试剂盒(美国Promega),转染脂质体(Lipofectamine 2000,美国Thermo Scientific) ......
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