杨 琨，李 骏，丰奇昊，沈梦杰，陈谦谦，罗雅馨，刘 琪，温秀杰

    (1.遵义医学院附属口腔医院 牙周科，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院附属口腔医院 种植科，贵州 遵义 563099；3.陆军军医大学大坪医院 口腔科，重庆 400000)

    颅神经嵴(cranial neural crest，CNC)来源的外胚间充质干细胞(ecto-mesenchymal stem cell)，是除牙釉质以外所有牙齿组织的形成细胞[1]。在牙齿的发育过程中，这些细胞迁移至上下颌突，与牙源性上皮相互作用形成牙囊和牙乳头，进而分化为多种牙齿组织发生细胞，经过一系列的分化机制，形成牙槽骨、牙骨质和牙本质等组织[2]。来源于颅神经嵴的EMSCs在颌面部及牙齿的发生发育过程中起到非常重要作用。而EMSCs的增殖及迁移能力以及上皮—间充质的相互作用是目前牙发育研究乃至牙组织工程研究所关注的重点。

    MAGE-D1同样称为NRAGE或者Dlxin-1，属于MAGE家族蛋白[3-4]。一共有32个MAGE家族的蛋白被检测出，但是这个家族正常生理学功能仍然不清楚[5]。hMAGE-A、hMAGE-B和hMAGE-C等亚家族成员只表达在男性精子细胞及胎盘中[5]，在许多正常组织中属于缄默基因[3,5]。然而许多MAGE家族成员表达在多种肿瘤细胞中，因此对其抗肿瘤免疫治疗引起了特殊的兴趣[5]。hMAGE-D亚家族在许多正常组织及处于不同的表达水平[3,6-7]。mMAGE-D1主要表达在鼠科动物大脑及卵巢中[8]，表明MAGE-D1在雌性生育组织中起到非常重要的作用。前期研究表明，MAGE-D1是细胞凋亡、转录、细胞周期进程、细胞黏附及血管生成的调控因子[3-4,9-10]。目前大量的研究都表明，MAGE-D1在胸腺癌细胞[11]、胰腺癌细胞[12]、黑色素瘤细胞[13]及食管癌细胞[14]中的增殖迁移及侵袭生物学过程中存在非常重要的作用，但是我们感兴趣的是，上皮-间充质转化这一牙发育的基本过程可能也受到MAGE-D1的调控，特别是颅神经嵴来源的外胚间充质干细胞，能够参与上皮-间充质转化过程，并且进一步影响牙及颌面部组织的发育。我们已经证明在大鼠的外胚间充质干细胞中，MAGE-D1能与p75NTR结合从而影响细胞的骨向分化能力[15]，但在此过程中，外胚间充质干细胞骨向分化的影响是否会是MAGE-D1干预的细胞增殖迁移能力改变的作用？是本研究着重解决的问题。

    1 材料与方法

    1.1 试剂和仪器 DMEM-F12培养基、胰酶(Gibco,美国)；胎牛血清(Gibco ......