陈长梅，杜 倩，谢 睿，徐靖宇，陈远寿

    (1.遵义医科大学 生理学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学附属医院 消化内科,贵州 遵义 563099)

    肥胖是21世纪最严重的公共卫生流行病之一，目前已经成为全球性问题。研究发现：绝经后女性与绝经前相比，前者患肥胖的可能性增加三倍[1]。据美国胆固醇教育计划成人治疗组第三次调查报告显示，60岁以前女性肥胖的发病率普遍低于男性，在60～69岁时发病率迅速上升，到70岁以上女性肥胖的发病率已经明显超过同龄男性[2]。2009年关于北京市成年女性绝经前后肥胖发病情况分析结果显示，女性在50岁之前发病率显著低于男性，从50岁开始肥胖发病率(显著)升高迅速，开始超过男性[3]。以上研究提示雌激素减少与女性肥胖的发生发展密切相关。

    钙离子主要通过与钙敏感受体(Calcium-sensing receptor，CaSR)结合后产生作用。CaSR是一种G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)，是调节机体内钙离子平衡的主要受体，其介导的细胞内钙信号参与了多种途径影响肠道运动。例如：调节胰高血糖素样肽1(Glucagon-likepeptide1,GLP-1)、酪酪肽(Peptide tyrosine tyrosine，PYY)以及抑胃肽等脑肠肽的释放，以维持机体能量及葡萄糖代谢平衡[4-5]。但是目前有关雌激素-钙敏感受体与葡萄糖吸收之间的相互关系鲜有报道。因此，在本项目中，我们研究在雌激素分泌缺失情况下，CaSR在小鼠十二指肠的表达，及其在十二指肠葡萄糖吸收中的作用，为研究雌激素对肥胖的影响提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验分组 4周龄SPF级C57雌鼠(重庆陆军军医大学附属大坪医院动物中心提供)，选择性成熟期(6周龄)C57雌鼠36只在全麻下进行假手术和去卵巢，把18只去卵巢雌性C57小鼠作为去卵巢组，18只假手术雌性C57小鼠作为假手术组。卵巢切除手术步骤：术前12 h 禁食不禁饮，按80mg/kg体重的剂量给予小鼠腹腔注射浓度为0.5%戊巴比妥钠。小鼠麻醉后行背部切口，分离组织找到呈粉红色桑葚样卵巢，切除卵巢止血后把输卵管还纳入腹腔，缝合切口并涂抹金霉素眼膏，术后保暖以促进小鼠复苏，每天涂药以防止切口感染，待小鼠伤口完全愈合。手术2周后进行实验。

    1.2 主要实验材料及试剂 CaSR (ab19347)和β-actin单克隆抗体购自Abcam公司，牛血清白蛋白(BSA)购自北京博奥拓达科技有限公司、封闭蛋白干粉购自武汉博士德生物技术有限公司、鼠二抗购自艾比玛特生物医药(上海)有限公司和兔二抗购自艾比玛特生物医药(上海)有限公司、免疫组化试剂盒购于北京博奥森生物公司 ......