李世月，黄 波，周金鑫，黄 娟，石京山，蒋青松，吴 芹

    (1.遵义医科大学 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室，贵州 遵义 563099；2.重庆医科大学 药理学教研室暨重庆市生物化学与分子药理学重点实验室，重庆 400016)

    心肌肥厚是多种因素引起心肌组织超负荷代偿反应的结果，与心血管病人心力衰竭和猝死的发生密切相关。在细胞水平，心肌肥厚表现为心肌细胞直径增大、蛋白合成增加等，又称为心肌细胞肥大，简称心肌肥大。心肌肥大的形成是一个复杂的病理过程，其药物治疗和作用机制一直是人们关注的热点，但近年一直未有突破性进展。吴茱萸次碱(rutaecarpine，Rut)是从贵州省道地中药材吴茱萸中提取的一种吲哚喹唑啉类生物碱。Rut可促进降钙素基因相关肽释放，改善缺氧和异丙肾上腺素诱导的心脏重构[1-3]。我们前期研究发现，Rut通过抑制MAPK/ERK信号传导对压力负荷型心肌肥厚的发生具有抑制作用[4]。一氧化氮(nitric oxide，NO)是内皮细胞分泌的舒张血管的重要活性物质，其水平或活性下调也参与了心肌肥厚的形成[5]。Xu等[6]的研究发现，Rut通过促进一氧化氮(nitric oxide,NO)生成，对大鼠颈动脉内膜增生有抑制作用。那么，除了上述信号通路，NO是否也参与了Rut的抗心肌肥大作用？这是值得深入研究的问题。

    本实验拟采用乳鼠原代心肌细胞培养，研究Rut对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导心肌细胞肥大的作用，并探讨NO在其中的作用，以期为Rut的进一步研发应用提供基础药理学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 药品与试剂 Rut(纯度为98%，南京泽郞科技有限公司，批号：20110934)；Ang Ⅱ(Anaspec公司)；胰蛋白酶(生工生物工程有限公司)；DMEM干粉(GIBCO公司)；标准胎牛血清(天津灏洋生物品科技有限公司)；RIPA裂解液、NO和一氧化氮合成酶(NO synthase,NOS)检测试剂盒及BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物技术研究所)；PCR引物由大连宝生物工程有限公司负责设计及合成；其它试剂均为国产分析纯 ......