邹盛楠，李春鸣，杨 华，梁 娜

    (1.遵义医科大学附属医院 病理科，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学 组胚学教研室，贵州 遵义 563099)

    胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，位居消化道恶性肿瘤的首位[1]。据统计，全世界每年有990 000例新诊断的胃癌病例[2]。目前，临床上以手术治疗为主，辅以放化疗。随着治疗方法的不断改进，胃癌患者的生存率得到显著提高。然而，由于胃癌的早期症状不典型，容易被忽视，患者就诊时多伴有明显浸润和广泛转移，手术后中位存活时间常为12～20个月[2]。胃癌患者生活质量的大大降低，给患者及其家庭，乃至社会造成了沉重的精神及经济负担。因此，探索潜在的肿瘤抑制基因，明确其新的治疗靶点，对于胃癌的临床治疗是极其必要的。

    KAI1又称为CD82，研究发现它不仅与细胞分化、生长和增殖等生理过程有关，还与肿瘤浸润和转移等病理状态有关。近年研究表明，KAI1基因是前列腺癌、肺癌、肝癌、甲状腺癌和胰腺癌等诸多恶性肿瘤的转移抑制基因[3]，但不同胃癌细胞中KAI1基因的表达是否有差异，其对体内外生长、迁移是否有影响，尚未有相关研究报道。本研究拟采用Western Blot、RT-PCR等方法对不同分化程度胃腺癌细胞中KAI1蛋白及mRNA表达水平进行检测，结合MTT、细胞周期和Transwell实验，进一步通过构建裸鼠腹腔移植瘤模型，比较与分析不同分化程度胃腺癌细胞在体内、外生长及迁移情况，旨在为KAI1基因高低表达胃癌细胞株的筛选以及KAI1基因分子机制的研究提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂 人胃腺癌低分化BGC823细胞株由遵义医科大学病理教研室保存，人胃腺癌中分化SGC7901细胞株、人胃腺癌高分化MKN28细胞株购自广州吉妮欧生物有限公司；南美胎牛血清、DMEM培养基购自于GIBCO公司；兔抗人KAI1单克隆抗体购自美国Abcam公司；鼠抗人Tubulin单克隆抗体、逆转录试剂盒、扩增试剂盒购自北京全式金生物；KAI1、Actin正反向引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成； MTT试剂盒、细胞周期试剂盒购自北京索莱宝公司；Transwell小室(24孔板)购自美国康宁；4 周龄健康雌性 BALB/c-nu 裸鼠购自重庆滕鑫公司SCXK(京)2014-0004。

    1.1.2 仪器 酶标仪(1500) 美国Thermo，细胞计数仪(IC1000)中国睿珏仪器，流式细胞器(CytoFLEX)德国Beckman，实时定量 PCR 仪(MyiQ2)、蛋白曝光系统 (ChemiDoc)美国 BIO-RAD ......