宋思远，徐先林，丁宪波，陆红玲，卓 铭

    (1.遵义医科大学 生物化学与分子生物学教研室，贵州 遵义 563099；2.美国德克萨斯大学 MD安德森肿瘤中心和医学部，Taxax Galveston 77555)

    铂类抗癌药物是用于肿瘤治疗的一线抗癌药物，其中顺铂(Cisplatin，DDP)是顺式-二氯二氨合铂(II)的商品名，是最早应用的肿瘤治疗药物，至今仍被广泛应用于多种癌症的治疗，然而顺铂在使用过程中会伴有较为严重的神经性损伤副作用，如何减轻此类副作用一直是国际临床抗癌药物应用的难题。背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG)来源于神经嵴的脊神经节内的感觉神经母细胞发出的轴突，呈束状，左右对称的从神经管的背部进入，是各椎间孔内侧面附近脊髓背根的膨胀结节。研究表明，顺铂可以在背根神经节中大量积累，导致DRG神经元的细胞体萎缩，神经末梢损伤，甚至引发细胞凋亡[1-3]。

    氯苯甲嗪(Meclizine)是一种组胺受体拮抗剂，商品名为美克洛嗪，多用于治疗晕动症引起的眩晕、呕吐等症状，是广泛应用的抗晕车药。研究发现，在小脑动脉阻塞的小鼠中风模型上，预注射氯苯甲嗪的小鼠，脑坏死区域明显减少[4]；在以增长多聚谷氨酸片段变异而建立的亨廷顿舞蹈症模型上，氯苯甲嗪可增加细胞内ATP含量，改善神经细胞的形态，提高神经细胞的生存率[5]，提示其有神经保护作用。目前，氯苯甲嗪的神经保护机制并未完全阐释清楚，其能否减轻由顺铂造成的DRG神经元损伤尚无相关报道，为了进一步了解氯苯甲嗪对外周神经系统是否具有保护作用，本课题选择小鼠背根神经节神经元为研究对象，观察顺铂与氯苯甲嗪对DRG神经元生长的影响，为临床解决顺铂抗癌的神经损伤副作用提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 成年昆明小鼠，雌雄不限，体重25～30 g，购买自重庆医科大学实验动物中心，生产许可证号：SCXK(渝)2018-0003。

    1.2 主要仪器设备 Xcellence型活细胞工作站，MCO-20AIC型细胞培养箱。

    1.3 主要试剂 顺铂、纯度96%氯苯甲嗪、层粘连蛋白、多聚鸟氨酸、Polκ抗体(SIGMA 公司)；神经丝蛋白抗体NF200(博士德生物公司)；γH2AX抗体(博奥森生物技术有限公司)；山羊抗兔二抗、山羊抗鼠二抗、DAPI(invitrogen公司)；TUNEL凋亡试剂盒(Roche公司)；其余试剂为国产试剂 ......