刘俊江，周正平，袁 丹，刘蒙蒙

    (1.遵义医科大学 病理学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学 电镜室，贵州 遵义 563099)

    子宫内膜癌(Endometrial carcinoma)是来源于子宫内膜上皮细胞的恶性肿瘤。在美国，它是发病率最高的妇科恶性肿瘤，对女性健康造成了严重的威胁[1]。根据流行病学特征及临床特点，子宫内膜癌可分为两种类型，其中，I型为雌激素依赖型(占比约80%)，子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma,EC)是其主要的组织学类型。II型为非雌激素依赖型(占比约20%)，以浆液性癌为主[2]。研究表明，EC发病除与长期处于无孕激素的高水平雌激素(estrogen，E)环境密切相关外，还可能与细胞周期调控紊乱、多种癌基因的激活或抑癌基因的失活等因素相关[3]。p57kip2作为CKIs中CIP/KIP家族一员，可调节Cyclin蛋白和CDK，控制DNA复制，负向调控细胞周期。而Cyclin E作为Cyclin家族的一员，主要通过与CDK2结合，正向调节G1/S期的转换，加快细胞周期进程[4-5]。

    本课题组前期研究发现，p57kip2在子宫内膜癌中的表达不同于其它恶性肿瘤，推测女性激素可能参与调控p57kip2在子宫内膜癌中的表达。Cyclin E蛋白的异常增高可能是子宫内膜癌发生的早期事件，且参与了子宫内膜癌进展[6-7]。但在E干预下人子宫内膜样癌Ishikawa细胞中p57kip2及Cyclin E的表达情况，目前国内外罕见报道。本实验拟选用人高分化EC Ishikawa细胞，予低、中、高3种不同浓度(10-4、10-2、1μmol/L)雌二醇(β-Estradiol,E2)干预，进一步探讨E调控、细胞周期调控对EC发展的影响。

    1 材料与方法

    1.1 细胞来源 人高分化EC Ishikawa细胞购自南京凯基公司。

    1.2 仪器与试剂 倒置显微镜(CKX41SF)为日本OLYMPUS公司产品；透射电子显微镜(H-7650)为日本日立公司产品；WB及RT-PCR相关仪器为美国BIO-RAD公司产品；酶标仪为美国Thermo Fisher公司产品。MTT粉末购自北京Solarbio公司；鼠抗人Cyclin E单克隆抗体购自圣克鲁斯生物技术(上海)有限公司；鼠抗人p57kip2单克隆抗体购自英国Abcam公司；异硫氰酸荧光素标记的羊抗鼠IgG(二抗)、鼠抗人β-actin单克隆抗体均购自碧云天生物技术(上海)研究所；E2为北京华迈科生物技术公司产品；RT-PCR相关试剂盒为宝生物工程(大连)有限公司产品 ......