刘士明，丁 涛，雷良玉，胡 琳，冒 灵，陈 超，郭萌萌，徐 林

    (贵州省基因检测与治疗特色重点实验室暨贵州省生物治疗人才基地暨遵义医科大学 免疫学教研室，贵州 遵义 563099)

    结直肠癌是最常见的原发性恶性肿瘤之一，近年来，其发病率和死亡率逐年上升并呈现年轻化的趋势，对人的生命健康造成重大的威胁[1-2]。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是真核生物在进化过程中一种高度保守的机制, 它与共抑制、协同抑制、基因沉默、基因阻滞以及发育等许多重要的生物学过程密切相关[3-4]，也可利用其干扰肿瘤细胞中特定基因的表达，用于肿瘤发生机制的探讨和基因治疗策略的开发[5-6]。Ⅰ型辅酶脱氢酶1α亚复合物4(NADH dehydrogenase 1 alpha subcomplex 4,NDUFA4)，是由定位于人7号染色体p21.3上的NDUFA4 基因编码的线粒体呼吸链蛋白质，也是哺乳动物线粒体细胞色素C氧化酶(COX;Complex IV)中的重要亚基，分子量约为9 kb，具有NADH脱氢酶和氧化还原酶活性，能够将电子从NADH转移至呼吸链，参与能量代谢[7-8]。已有研究显示NDUFA4基因的异常改变与包括肿瘤在内的多种疾病发生发展密切相关[9-10]。然而，NDUFA4在人结直肠癌发生中的可能作用和机制尚未清楚。因此，本研究旨在利用RNA干扰技术(RNAi)，观察下调NDUFA4表达对人结直肠癌SW480细胞体外生长的影响，并初步探讨其作用机制，为后续深入研究NDUFA4分子在人结直肠癌发生中的作用提供前期实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 细胞株、质粒和主要试剂：人结肠癌SW480细胞株购于中国生命科学院，p-Cont质粒(P-EGFP-N1质粒)由本实验室保存 ......