曾凤娇，杨 琳，刘建国，田 源，陈 靖，白国辉

    (1.遵义医科大学 研究生院，贵州 遵义 563099；2.贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室，贵州 遵义 563099；3.贵阳市口腔医院，贵州 贵阳 550002)

    牙周病是危害人类牙齿及全身健康的主要口腔疾病，发病率高，严重影响着1/3成人以及超过50%的65岁以上老年人的牙齿健康[1]。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis，P.gingivalis)对于慢性牙周病具有明确的致病作用[2]，P.gingivalis主要通过其菌体表面的多种毒力因子发生致病作用[3]。

    牙龈素是P.gingivalis重要的毒力因子，有研究表明其在细菌逃避免疫防御机制中也发挥了一定的作用[4]，对于牙周组织的破坏过程中产生重要的影响。rgpA基因是牙龈素的编码基因之一，其中有一段名为血凝集素黏附结构域(hemagglutinin A,hagA)的功能基因，分别编码HA1、HA2、HA3、HA4结构域。有学者对4个结构域进行功能分析，认为HA2为P.gingivalis的关键区域，能够调控介导细菌凝集并黏附至牙周组织，破坏牙周组织形态[5]。

    本文在原核表达质粒pET21a-ha2成功构建的基础上，检测其在大肠杆菌中的表达，并纯化鉴定表达产物，为课题组后期SIgA型抗HA2特异性抗体的检测和疫苗在动物体内的表达检测奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 原核表达质粒pET21a-ha2、Rosetta感受态细胞由贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室提供。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒、Ni-NTA琼脂糖凝胶6FF(索莱宝公司，北京)；DNA Marker(BM5000)(Biomed ......