阮 颖，郑 洪，刘华庆，黄佳佳，谭 娜，王 凯

    (遵义医科大学附属医院 病理科，贵州 遵义 563099)

    宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一[1]。我国宫颈癌发病率15/10万，近年来发病趋势明显年轻化，且早期患者增多[2]。随着医学分子技术的发展以及对表观遗传学的重视，发现抑癌基因的异常甲基化可导致目的基因及调控基因的转录失活，促进肿瘤的发生[3]。配对盒家族基因 1(Paired box gene 1，PAX1)是一种重要的抑癌基因，PAX1 甲基化抑制細胞分化，可影响宫颈癌前病变的病理进程[4]。PAX1蛋白是一类非常保守的转录因子，它在机体发育和疾病中有着重要的作用[5]。然而，少有文献对PAX1甲基化与蛋白表达在宫颈鳞癌及上皮内病变的临床病理学意义进行报道，本研究旨在分析PAX1甲基化与其蛋白检测在宫颈鳞癌及上皮内病变中的应用价值。

    1 材料与方法

    1.1 标本 收集遵义医科大学附属医院病理科2014年1月至2018 年 10月存档的320例宫颈病变患者石蜡标本。根据病理诊断结果将其分为慢性宫颈炎症(组Ⅰ，93 例)、低级别鳞状上皮内病变(组Ⅱ， 20 例)，高级别鳞状上皮内病变(组Ⅲ， 112 例)及宫颈鳞癌(组Ⅳ，95例)。鳞癌组标本包括Ⅰ期73例，Ⅱ期22例；按病理分型：角化型54例，非角化型41例；按淋巴结转移分为：阳性27例，阴性68例；按有无复发分为：阳性7例，阴性88例。以上标本术前均未曾行放疗、化疗及免疫治疗，所有活检标本均经10%的中性福尔马林液固定，切片HE染色后由专业病理医师参照2014年WHO诊断标准进行诊断[6]。

    1.2 研究方法

    1.2.1 PAX1甲基化检测 首先提取石蜡样本DNA，用亚硫酸氢盐转化后的DNA(BisDNA)，进行PCR扩增，采用实时荧光定量PCR仪检测PAX1甲基化状态做定性分析， 严格按照试剂盒说明书操作并进行判读。阳性判读标准：目的基因CT值≤ 20情况下，目的基因CT值内标基因CT值 ，△CT≤4。阴性判读标准：目的基因无扩增曲线，或者目的基因CT值>内标基因CT值，且△CT>4(△CT=目的基因CT值-内标基因CT值)。 PAX1甲基化上游引物 ......