宋 慧，王英豪，李 霞

    (恩施土家族苗族自治州中心医院 眼科中心， 湖北 恩施 445000 )

    脉络膜黑色素瘤(Choroid melanoma，CM)主要发生于成人眼部的原发性、恶性肿瘤，该肿瘤细胞易发生转移导致患者死亡。流行病学调查发现，约90%患者出现肝转移，且平均生存时间为半年[1]。CM患者接受治疗后，其中50%会出现转移，且10年的生存率也只有50%[2-4]。CM患者经常会导致视力丧失，其中33%患者会进行眼球摘除术[5]。CM的早期诊断和治疗是改善患者生存质量的关键，对其发病机制进行深入研究及寻找有效的药物治疗是迫在眉睫。

    磷脂醇3激酶(PI3K)/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路异常激活与多种肿瘤的发生发展密切相关[6-7]。在黑色素瘤细胞也发现PI3K/AKT/mTOR信号传导异常活化[8]，该信号与肿瘤细胞的多种生物学行为密切相关，包括细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡等[6-7]。因此，阻断PI3K/AKT/mTOR信号传导可能成为治疗脉络膜黑色素瘤的新策略[9]。目前，已研发出PI3K/AKT/mTOR信号通道抑制剂用于临床前治疗各种类型肿瘤[6-7]。

    近年来，一种新型的PI3K抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin)已得到广泛研究，它可以特异性抑制PI3K信号传导，对其上游信号没有干扰[10-11]。因此，本文探讨了渥曼青霉素对脉络膜黑色素瘤MuM-2C细胞增殖、克隆、迁移、侵袭及凋亡的影响，以期为临床应用渥曼青霉素提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要药品与试剂 渥曼青霉素购买于北京AdooQ Bioscience公司；其它PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制剂(LY3023414、纳巴霉素、OSI-027和MK-2206)购买于上海Selleck公司；Annexin V-FITC/PI和CCK8试剂盒购自江苏碧云天生物技术研究所；兔anti-Cleaved-caspase-3、兔anti-Cleaved PARP、兔anti-p-P85 (Y458)、兔anti-P85、兔anti-p-AKT (S473 and T308)、兔anti-AKT、兔anti-p-S6K (T389)、兔anti-S6K和兔anti-β-actin购自英国Abcam公司；Caspase-glot-3/-9活性测定试剂盒购买于美国Promega公司；ELISA ss DNA试剂盒购买于武汉华美生物有限公司 ......