税成愈，向 灿

    (1.恩施州中心医院西医部 妇产科，湖北 恩施 445000；2.华中科技大学同济医学院附属同济医院 妇产科，湖北 武汉 430000)

    宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率位居妇科恶性肿瘤第2位[1]，全球每年约26万女性死于宫颈癌，研究表明宫颈癌的致病因素众多，目前对于宫颈癌的发病具体分子机制尚不完全清楚[2]。膜相关RINpCH(Membrane-associated RING-CH，MARCH)家族是属于E3泛素连接酶的环指结构域的一类家族，MARCH家族有11名成员。MARCH8(Membrane-associated RING-CH8)是第一个于哺乳动物发现的MARCH蛋白，有研究显示MARCH8过表达会下调免疫调节蛋白表达，包括MHC II、B7-2、TfR、CD166、CD88以及CD44等[3-5]。已有研究表明MARCH8介导的TNF相关细胞凋亡的下调(包括诱导TRAIL-R1)已被证实可以阻止乳腺癌细胞凋亡，这提示着MARCH8可能成为基因沉默或敲除研究的潜在靶点，为癌症患者治疗提供参考[6]。但是MARCH8对宫颈癌细胞增殖、凋亡相关的报道较少，因此本文通过本院收集的宫颈癌组织以及体外细胞MARCH8沉默试验来探索MARCH8对宫颈癌的影响，并对其可能存在的机制进行研究，为治疗宫颈癌寻找新的分子靶点提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    1.1.1 样本材料 选取我院宫颈癌手术切除标本20份作为研究对象，同时选取20例正常宫颈组织人群作为对照。所有患者及其家属均自愿参与并签署知情同意书，并经过本院伦理委员会通过，所有组织均于-80℃保存。人宫颈癌细胞系Hela由上海通蔚实业有限公司提供。

    1.1.2 试剂及仪器 MARCH8、血清中Bcl-2、Bax、p53、GAPDH、Ki67、Caspase-3抗体以及抗小鼠/兔IgG(Cell Signaling Technology)，ECL Kit(Thermo Fisher)，二氨基联苯胺(DAB)，DNR BioImaging System(DNR，Israel)，10%胎牛血清(Sigma-Aldrich)，青霉素(MerckKGaA)，链霉素(Darmstadt)，Dulbecco's改良Eagle’s培养基(Thermo Fisher)，Lipofectamine2000(Thermo Fisher)，TRIzolKit(Thermo Fisher)，Revertaid First Strand cDNA Kit(Thermo Fisher) ......