邓 玲，彭波辉，彭 昌

    (遵义医科大学附属医院 小儿内科，贵州 遵义 563099)

    临床研究及动物实验证实，心肌肥厚是多种心脏疾患发生、发展过程中的一个重要阶段，是诱发患者心衰及心源性猝死的重要原因之一[1-4]。而目前针对该病的预防及治疗措施均不完善，且有一定的局限性，疗效不显著。因此，寻求针对心肌肥厚更为理想的防治措施成为亟待解决的重要课题。组蛋白修饰作为表观遗传学的重要修饰方式之一，受组蛋白乙酰化酶(Histone acetylases,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylases,HDACs)调控，并在心肌肥厚过程中起着重要作用[5-6]。绿茶以表没食子儿茶素没食子酸酯(ECCG)为其主要成分，含量最高，活性最强，具有抗肿瘤、抗突变、抗氧化、降压降糖、防龋齿等多种生物学效应[7-8]。有研究报道，EGCG在表观遗传调控中发挥了重要调控作用，如通过抑制经典Ⅰ类HDACs参与基因的表达与调控[9]，且本课题组前期研究发现组蛋白乙酰化修饰失衡参与了心肌肥厚的发生发展。但EGCG是否是能通过调控HDAC改善小鼠心肌肥厚国内外报道相对少见。因此，本研究将采用苯肾上腺素诱导小鼠心肌细胞肥大来探讨EGCG在该病理生理过程中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 所有的实验动物均由陆军军医大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(渝)2017-0015。100只清洁级健康新生昆明小鼠，出生1～3 d，雌雄不限。

    1.2 主要试剂与仪器 细胞裂解液购自北京普利莱基因技术有限公司；超敏发光液购自赛默飞；PVDF膜购自 Merck Millipore公司；兔抗GATA4、ANP、β-MHC、HDAC2及GAPDH多克隆抗体及其检测试剂盒(检测限：5～200 ng/mL)均购自美国Abcam公司；EGCG(纯度95%)购自美国Sigma公司；抗Alexa Flour 488荧光标记山羊抗小鼠IgG荧光二抗购自中杉金桥生物技术有限公司；抗α- actin及HRP标记二抗购自Proteintech公司；荧光定量PCR试剂盒及逆转录试剂盒购自TaKaRa；HDAC2活性检测试剂盒购自GenMed公司；Chemi DocTM XRS + 超高灵敏度化学发光成像系统、CFX Connect[TM]实时荧光PCR仪购自伯乐生命医学产品(上海)有限公司；UV-1600PC型紫外分光光度计购自上海美谱达仪器有限公司 ......