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编号:808485
靶向抑制c-Myc表达与吉西他滨联合应用增强膀胱肿瘤细胞的化疗敏感性
http://www.100md.com 2020年6月23日 遵义医科大学学报 2020年第2期
阴性,1材料与方法,2结果,3讨论
     卢 童,徐 康

    (1.湖北省天门市第一人民医院 泌尿外科,湖北 天门 431700;2.武汉科技大学 职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北 武汉 430081)

    膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的恶性肿瘤[1],其中以移行细胞癌最为常见。多数膀胱肿瘤患者需接受膀胱内灌注化疗,以期降低膀胱肿瘤复发机会。吉西他滨(Gemcitabine,Gem)是一类胞嘧啶核苷衍生物,主要作用于细胞周期的S期,通过干扰DNA复制发挥抗肿瘤效应,目前常用于膀胱灌注化疗[2-3]。但是在使用了一定治疗周期此类药物后,膀胱肿瘤细胞对其化疗敏感性会逐渐下降。c-Myc是Myc家族的重要成员,是一类重要的原癌基因,在多种肿瘤组织中呈高表达[4-6],近期部分研究提示抑制c-Myc表达可提高胰腺癌和骨肉瘤等恶性肿瘤对化疗药物的敏感性[7-8]。基于上述研究背景,本研究拟采用小干扰RNA靶向下调c-Myc在膀胱肿瘤细胞中的表达,检测其与吉西他滨联合应用对化疗效果的影响,并初步探讨其可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 免疫组化 选取27例膀胱移行细胞癌组织及22例癌旁组织,按以下基本步骤行免疫组化检测:所有标本经固定包埋后制成5 μm切片,经脱蜡入水,阻断和抗原修复后,使用c-Myc一抗(CST公司)于1∶200浓度、4℃条件下孵育过夜,洗脱后,使用HRP标记的二抗(博士德生物公司)于1∶1 000浓度、室温条件下孵育20 min,随后显色并拍照,经图像分析系统检测获得c-Myc在各个组织中表达的平均光密度值。

    1.2 小干扰RNA合成 本研究中针对c-Myc序列设计合成一组小干扰RNA(si-c-Myc) ......

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