刘世柱，张卫华，蔡 琳，孙文泽，安小兰，崔国祯

    (1.杭州胡庆余堂国药号有限公司，浙江 杭州 31009；2.国家中药现代化工程技术研究中心 保健食品分中心，广东 珠海 519041；3.遵义医科大学 珠海校区生物工程系，广东 珠海 519041)

    黄褐斑又称为“肝斑和蝴蝶斑”，是人类面部常见的皮肤色素代谢障碍性疾病，女性患黄褐斑的概率远高于男性，对患者的生活质量有一定的负面影响[1]。近几年，黄褐斑的发病率呈不断上升趋势，其防治已引起医学界的高度重视，研究人员在临床和实验研究方面做了大量的研究工作。然而，多种防治方法，均存在易复发和安全隐患等问题[2]。黄褐斑的发病机制尚未完全阐明，目前的研究表明，引起黄褐斑的致病因素众多。研究发现紫外线辐射、内分泌失调、氧自由基、药物和化妆品不正当的使用及遗传等因素是引起黄褐斑的主要原因[3]。

    中医学认为“无淤不成斑”，气滞血淤导致面部黑色素沉着形成斑块。人体在中医学上被视为一个有机整体，肝、脾和肾这三个脏器的失调是黄褐斑发病的关键，中医的防治理念主要是“疏肝理气，活血化瘀”。基于以上中医理论，以桃红四物汤(由当归、生地、川芎、白芍、桃仁和红花组成)为基础方，结合中医理论，对本方进行调整。以当归、白芍、川芎、红花、丹参和葡萄籽提取物按照一定的比例配制成防治黄褐斑的组方。从理论上讲，该配方具有活血通脉、补血养颜和祛斑的功效。本研究以黄褐斑小鼠模型为实验对象，观察该复方对黄褐斑的预防作用，并探讨其可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 昆明种SPF级雌性小鼠40只(购买于广东省实验动物中心)体重35～40 g，饲养于遵义医科大学珠海校区实验动物中心，屏障环境动物房(室温22±1 ℃，12 h光照/12 h黑暗)，动物许可证号为：[SCXK(粤)2013-0002]。

    1.2 药品与试剂 当归、白芍、川芎、红花和丹参(广州至信药业股份有限公司)；葡萄籽提取物(原花青素含量为95%，天津市尖峰天然产物研究开发有限公司)；黄体酮注射液(浙江仙珺制药股份有限公司)；超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)；酪氨酸酶(Tyr)试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)；抗黑色素瘤特异抗体(HMB45)(福建迈新生物有限公司)；DAB试剂盒(康为世纪生物科技有限公司)；8% Na2S水溶液(广州化学试剂厂) ......