七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-23a-3p对肺癌细胞增殖和凋亡的影响
荧光素酶,试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
陈 丹,刘 佳,吴 丹(四川大学华西医院 广安医院,四川 广安 638500)
肺癌是男性最常被诊断出的癌症。2018年,约有210万新发病例,在所有癌症类型中排名第一,也是癌症死亡的主要原因,占癌症死亡人数的近五分之一,与大多数国家相比,中国的肺癌死亡率相对较高。预计到2030年,中国的肺癌死亡率可能会增加约40%[1-3]。目前,肺癌切除术是临床上治疗早期肺癌最重要的方法之一[4]。越来越多的证据表明,外科切除术中使用的麻醉剂也具有一定的非麻醉生理作用,这可能会影响肿瘤细胞的增殖、凋亡和转移能力[5-6]。七氟醚(Sevoflurane, SEV)是一种临床常用的挥发性麻醉剂,先前的研究表明,七氟醚可能在多种肿瘤中发挥作用,例如肺癌[7]、乳腺癌[8]、宫颈癌[9]。这些报道表明七氟醚在恶性肿瘤中具有潜在的临床应用价值,但其对肺癌细胞恶性行为的分子机制尚未完全阐明。新的资料显示,长链非编码RNA(Long noncoding RNA, lncRNA)Gm15621的过表达通过抑制微小RNA(MicroRNA,miRNA/miR)-133a/Sox4,减轻七氟醚治疗引起的细胞凋亡和炎症反应[10],lncRNA SNHG1通过下调miR-181b介导七氟醚调控的神经细胞增殖、凋亡和炎症[11],可见lncRNA和miRNA参与七氟醚的细胞增殖和细胞凋亡调控过程。lncRNA Maternally expressed gene 3(MEG3)在肺癌组织和细胞中低表达[12],miR-23a-3p在肺癌组织和细胞中高表达[13],二者在肺癌发生发展中均发挥重要作用。然而,七氟醚是否通过MEG3调控miR-23a-3p来影响肺癌细胞的增殖和凋亡,以及MEG3与miR-23a-3p的靶向调控作用,目前仍不清楚。因此,本研究考察七氟醚对肺癌细胞增殖和凋亡的影响,并结合MEG3与miR-23a-3p,旨在阐明其可能的分子机制。
1 材料与方法
1.1 细胞与主要试剂 人正常肺粘膜细胞GES-1、肺癌细胞A549购自中科院上海生命科学研究院细胞资源中心;Roswell Park Memorial Institute(RPMI)-1640培养基、胎牛血清(Fetal calf serum,FBS)购自美国Gibco公司;miR-23a-3p、miR-23a-3p阴性对照miR-con、si-MEG3、si-MEG3阴性对照si-con购自上海吉玛公司;Lipofectamine 2000转染试剂购自美国Invitrogen公司;PrimeScriptTMRT试剂盒、SYBR Premix Ex Taq试剂盒购自日本TaKaRa公司;细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit-8 ......
您现在查看是摘要页,全文长 11359 字符。