王志刚，梁 亮，赵华才，管振锋，孙 羿，程永毅

    (1.西安交通大学，陕西 西安 710000；2.陕西省人民医院 泌尿外科，陕西 西安 710000)

    膀胱癌是男性泌尿系统发病率最高的肿瘤[1]，也是全世界常发肿瘤之一[2-3]，年新发病例约为549 000，膀胱癌相关年死亡病例约为199 900[4]，膀胱癌可以分为非肌肉浸润性肿瘤和肌肉浸润性肿瘤[5]，其中尤其以高级别浸润性膀胱癌为代表[6]，其恶性程度高，转移率高[7]，患者临床预后差[8]。虽然对膀胱癌的治疗以手术切除为主，辅以放化疗提高局部控制率及降低远处转移率，但是手术后患者容易复发[9]，使得术后总体生存率较差；而放化疗虽然可以取得较好的疗效，但其副作用较大。故寻找膀胱癌中突变的基因，并研究其具体的调控机制，尤其是针对膀胱癌浸润、转移的分子调控机制，对于膀胱癌的诊断、治疗及预后预测尤为重要。

    G蛋白调节因子2 (G protein regulating factors 2，RGS2) 在细胞的空间分布广泛，可见于细胞膜、细胞质和细胞核。RGS2在肿瘤中的调控作用已经有较多报道，RGS2的异常表达可见于多种肿瘤，如卵巢癌[10]、结肠癌[11]和前列腺癌[12]等，并参与调控恶性肿瘤生物学行为。但是，RGS2与膀胱癌的关系却鲜有报道，故本研究旨在探究RGS2在膀胱癌发展进程中的调控作用及其机制，并进一步探索其与膀胱癌患者临床预后之间的关系，为膀胱癌诊断精准性的提高和治疗新靶点的选择提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与器材 3种人膀胱癌细胞系：RT4、T24及RT-112(细胞系均从北京协和细胞库购买)。含GFP的si-RGS2及其对照si-RGS2 control(si-RGS2 ctrl)质粒从山东维真公司设计且购买。RGS2和GAPDH引物从上海生工公司购买。培养基1640 及Matrigel基质胶购于Coring公司；胎牛血清购于Gibco公司；枪头、培养皿、移液枪及Transwell小室等购于普京康利公司；乙醇TBST、电泳液及电转液等购于中科科奥公司；氨苄青霉素、链霉素购于雷根生物公司；SNAIL (兔IgG)、 MMP2 (兔IgG)、MMP9 (兔IgG)、Vemintin (兔IgG))、PCNA(兔IgG)、P-ERK (兔IgG)和ERK(兔IgG)等抗体均购于CST公司；化学发光试剂盒、HRP标记山羊抗兔IgG二抗及抗鼠IgG二抗购于碧云天公司；0.22 μm孔径转印膜PVDF购于Millipore公司；Lipo2000 购于百灵克公司；CCK8试剂盒购于同仁公司；蛋白定量试剂盒及Trizol购于百诺威公司；荧光定量检测试剂盒及cDNA第一链合成预混试剂购于天根生化公司 ......