吉杨松，饶 澄，龙依琳，谢天宏，王世飞

    (遵义医科大学附属医院 耳鼻咽喉科，贵州 遵义 563099)

    耳聋是常见疾病，发病机制多与听觉皮层神经有关[1]，听觉皮层神经不仅可以接收听觉刺激，也可以处理早期的多感觉会聚，猕猴听觉皮层神经元对皮肤刺激也可产生反应，提示听觉皮层神经元受损引起的耳聋机制可能更为复杂。细胞凋亡尤其是神经元细胞的凋亡往往是不可逆的，听觉皮层神经元细胞凋亡一旦发生，引起持续性的听力下降，最终导致耳聋。给患者及其家属带来极大痛苦，也给社会带来较大的经济负担。增龄性聋(Age-related hearing loss,AHL)是指随着年龄的增长而出现的双耳对称、缓慢进行性的感音神经性听力减退[2]。随着我国人口老龄化的加剧，AHL的发病率呈逐年急剧增涨趋势，需予以高度重视，AHL的致病因素复杂，国内外近年来研究提示氧化应激、线粒体突变、细胞凋亡、炎症等多种途径都参与了AHL的发生发展，并且各种途径相互影响。因此，进一步明确AHL机制对老年性耳聋的进行预防、早期诊断、个性化治疗及听力言语康复具有重要意义。

    本研究观察敲除了miRNA-34a或SIRT6基因的老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡的差别以及对其听觉皮层神经元中B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关的x蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein，Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Cysteine aspartic protease8，Caspase8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteine aspartic protease3，Caspase3)表达的影响，以期探讨miRNA-34a、SIRT6对老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡的作用机制及相互关系。

    1 材料与方法

    1.1 动物 miRNA-34a基因敲除小鼠10只，SIRT6基因敲除小鼠10只，野生型小鼠10只，上述小鼠来源于实验动物均由南京大学模式动物研究所提供，按要求饲养于本单位实验动物中心，喂养至16月龄并成活。获遵义医科大学伦理委员会批准。

    1.2 药品及试剂 Bcl-2单克隆抗体、Bax单克隆抗体、Caspase8单克隆抗体、Caspase3单克隆抗体均购于武汉博士德生物有限公司。转移缓冲液、细胞裂解液、Bradford蛋白浓度测定试剂盒均购自美国R&D systems公司 ......