lncRNA PANDAR对KTC-3细胞生物学行为及RSK4信号通路的影响研究
甲基化,质粒,甲状腺癌,1材料与方法,2结果,3讨论
阿力木江·吾普尔,克力木·阿不都热依木,玉素甫·买买提,艾尼·沙塔尔(1.新疆维吾尔自治区人民医院 乳腺甲状腺科,新疆 乌鲁木齐 830054;2.新疆维吾尔自治区人民医院 微创、疝和腹壁外科,新疆 乌鲁木齐 830054)
甲状腺是由甲状腺滤泡和傍细胞组成,属于机体的内分泌系统,甲状腺激素能够调控机体的生长代谢以及多种物质的合成,但是如果出现甲状腺激素大量分泌后甲状腺激素不足,都会导致相应疾病产生[1-2]。分泌过多会导致甲状腺功能亢进,分泌减少会意味着功能衰退[3]。甲状腺癌(PCT)属于其中之一,占据整个甲状腺恶性肿瘤发病率9成以上,因为具有发病无显著症状,所以早期检测及有效治疗较为困难[4]。近几年,患有甲状腺疾病的人群不断增加,并以10%的概率递增,威胁患者生命健康[5]。长的非编码RNA(lncRNA)正在各种恶性肿瘤中作为基因调节剂和生物标记物出现[6]。PANDAR是一种新型的与癌症相关的lncRNA,在几种类型的癌症中均失调[7]。但是,其临床价值和对甲状腺癌的潜在影响仍不清楚。核糖体S6蛋白激酶(ribosomalS6kinase,RSK)4属于RSK家族,是一种丝苏氨酸蛋白激酶。已有研究报道,RSK4为促癌基因,其在结肠癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中显著升高[8]。甚至在一些良性病变中,如结肠腺瘤和乳腺乳头状瘤,其表达量也升高[9],但RSK4在PANDAR作用甲状腺癌细胞中的影响还未可知,因此,本篇文章通过克隆实验检测KTC-3细胞增殖,免疫细胞化学法检测RSK4蛋白阳性表达,qRT-PCR法检测lncRNA PANDAR表达量,Transwell检测KTC-3细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中RSK4蛋白含量,Hoechst 33258 荧光染色法检测细胞凋亡情况的差异性进行实验探究。
1 材料与方法
1.1 一般材料 华中科技大学购买甲状腺癌细胞(KTC-3细胞),随机分为过表达组(O组):将lncRNA PANDAR 慢病毒质粒与KTC-3细胞混合培养;阴性对照组(N组):将sh PANDAR 慢病毒质粒与KTC-3细胞混合培养;空白对照组(B组):KTC-3细胞与慢病毒包装质粒混合培养。
1.2 仪器与试剂 胎牛血清(上海传秋,中国);兔抗人RSK4抗体(上海北诺 ......
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