Villin1启动子调控miR-7-Sponge真核表达载体的构建及其对小鼠炎症性肠炎模型的影响
质粒,结肠,1材料与方法,2结果,3讨论
王 亚,赵娟娟,曾文焕,刘依婷,梁 杰,贺 钰,蒲廷莉,陈世鹏,李冬玫,徐 林(1.贵州省基因检测与治疗特色重点实验室暨贵州省生物治疗人才基地,贵州 遵义 563099;2.贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室,贵州 遵义 563099;3.遵义医科大学 免疫学教研室,贵州 遵义 563099)
随着生活节奏的加快,饮食结构的改变,炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)的发病率不断攀升,且易复发,严重影响人类的健康。炎症性肠病包括克罗恩氏病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)等,是一种病因(包括遗传学、环境、微生物菌群及免疫失衡等)尚不明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,其主要特征是黏膜下大量炎症细胞的浸润和肠上皮层的损伤[1-2]。因此,深入探讨 IBD 内源性的发生调节机制有助于为该疾病的预防、诊断和治疗提供新的策略。
MicroRNA(miRNAs)是进化保守的长度为18~24个核苷酸的单链非编码小分子RNA,可在转录后调控基因的表达水平[3]。近年来,已发现许多miRNAs参与IBD的发生和发展进程。如IBD患者肠道炎症粘膜中miR-301a升高通过下调SNIP1诱导IL-17和TNF-α的表达促进肠道粘膜炎症[4]。 CD或UC患者结肠组织中miR-31的增加,通过降低炎症细胞因子受体(Il7R和Il17RA)和信号蛋白(GP130)的表达,而减轻小鼠结肠上皮的炎症反应,同时通过调节WNT和Hippo信号通路,促进损伤后肠上皮细胞的再生[5]。另外也有研究显示,过表达miR-129可抑制泛素E3连接酶FBW7介导的IκBα降解和NF-κB活化改善了TNBS诱导的肠道炎症和结肠炎[6]。这些研究有力提示 miRNAs是IBD新的重要调节子。
MicroRNA-7(miR-7)作为miRNAs家族成员,不仅在多个物种中具有高度保守性,且在机体的多种重要生命过程及疾病进程中扮演重要角色,可作为多种疾病诊断治疗的靶标[7-8]。越来越多的研究表明miR-7在IBD等多种肠组织相关疾病的发生中具有重要调控作用。如Zhang等[9]发现通过改变HCT116、LOVO等多种肠系肿瘤细胞系中miR-7的水平,其可通过作用靶分子YY1抑制肿瘤的发生;Zeng等[10]的研究也显示上调结肠癌HCT-8和Caco-2细胞中miR-7水平可抑制肿瘤的增殖和侵袭;重要的是,Fasseu等[11]发现UC或CD患者发炎的结肠组织中miR-7的水平明显上调,另外也有研究显示miR-7在活跃期CD患者结肠组织中明显低表达[12] ......
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