周欣欣，张晓宇，周 辉，王小妹

    (1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410000; 2.湖南省第二人民医院 手足外科，湖南 长沙 410000)

    不可分型流感嗜血杆菌(Nontypeable haemophilus influenzae，NTHi)为革兰阴性杆菌,无荚膜，常寄居于人类上呼吸道，是重要的机会致病菌，能引起肺炎等炎症反应[1]。研究表明[2]，NTHi 在感染呼吸道过程中主要通过释放内毒素、以及蛋白水解酶等毒性产物，促进呼吸道粘膜炎症因子释放进而导致组织炎症反应。而过度的呼吸道炎症反应将进一步诱导慢性阻塞性肺疾病的发生[3]，因此有效预防NTHi感染所致的炎症反应在临床COPD的防治应用中具有重要意义。

    多种调控机制参与NTHi在感染呼吸道上皮细胞诱导炎症反应的过程。已有研究证实，NTHi感染肺泡上皮细胞株，能够激活p38 MAPK信号通路进而诱导炎症反应的发生[4]。此外，NTHi同样也可以通过ERK MAPK信号通路来上调肺泡上皮细胞株A549炎症因子IL-8的分泌[5]。尽管如此，但到目前为止我们仍不清楚NTHi具体的致炎机制。因此，本研究将以NF-κB信号通路为切入点，明确NTHi诱导人正常支气管上皮细胞BEAS-2B产生炎症因子的分子机制，进而为预防及治疗NTHi感染相关疾病提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 不可分型流感嗜血杆菌菌株(ATCC-49247)采购自美国ATCC公司；人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)采购于中科院细胞库；Human IL-1β、IL-6 ELISA检测试剂盒购自Invitrogen公司；TLR2干扰RNA购自InvivoGen公司；MyD88抑制剂NBP2-29328购自Sigma公司；NF-κB抑制剂(BAY11-7082)购自Santa Cruz生物技术有限公司；IκB、β-actin抗体采购于Cell Signaling Technology公司； PCR引物由上海生物工程有限公司合成 ......