杨 欣，卢癸凤，胡文慧，肖 智，耿 飞

    (1.遵义医科大学 生理学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学 病理生理学教研室，贵州 遵义 563099)

    结肠癌目前是世界上确诊排名前列的肿瘤，并且易复发和对化疗药物耐药，患者致死率逐年上升[1]。目前，手术和化疗是结肠癌的主要治疗手段，手术影响患者的生活质量，化疗具有毒副作用[1-2]。基因的异常表达被认为参与结肠癌的发生、发展。然而，关于结肠癌的发病机制仍有待于进一步的研究，新的生物学标志物和治疗靶点的发现将有助于结肠癌诊疗方法的发展。

    微小RNA(miRNA)是一类非编码RNA,长度为20～22个核苷酸，被认为可以调控基因的表达[3-4]。微小RNA通过结合靶基因的3’UTR区抑制信使RNA的翻译[5-6]，从而参与细胞的增殖、凋亡和分化[7-8]。已有大量微小RNA被揭示参与调控肿瘤的进程[9-12]。然而，结肠癌相关的微小RNA和它们的调控机制还有待于新的发现。最近的研究显示miR-671-3p在多种癌症中发挥着重要作用[13-14]。在胶质瘤细胞中，过表达miR-671-3p可以通过靶基因CDR1-AS、CDR1和ASNL1显著增加细胞的迁移和增殖能力[13]。miR-671分为miR-671-5p和miR-671-3p，其中miR-671-5p可以促进结肠癌的增殖[15]。然而，miR-671-3p在结肠癌中的作用及其机制还有待于研究。本研究主要探讨了miR-671-3p在结肠癌中的作用及其潜在的机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 人结肠癌细胞株RKO及SW620由遵义医科大学生理学教研室保存。RMPI 1640培养基购买自美国Hyclone公司；胎牛血清和胰酶购自Gibico生物公司；miR-671-3p mimic及抑制剂购自广州锐博生物科技公司；Trizol试剂购买自Invitrogen公司；Lipofectamine TM 2000转染试剂及BCA蛋白检测试剂盒购买自美国赛默飞世尔科技公司；荧光定量PCR相关试剂购买自TAKARA公司；miR-671-3p RT-PCR引物由锐博公司合成； CCK-8试剂盒购买自日本同仁公司；PVDF膜购买自美国Millipore公司；CKAP4一抗购买自武汉三鹰生物公司；辣根过氧化物酶标记的二抗购买自Abcam公司；Boyden Transwell小室购买自美国BD公司 ......