黄连素对脊髓损伤大鼠BMP-4 mRNA表达及神经元活性的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
仲 华,华 祥,陈 辉(1.邛崃市医疗中心医院 骨二科,四川 邛崃 611530;2.陆军军医大学第三附属大坪医院 创伤科 ,重庆 400042)
脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是临床中常见的疾病之一,其中,该病的主要发病原因为外力损伤,例如:车祸、打击伤、坠落伤等[1]。近年来,SCI的发病率逐年上升,给患者本身带来巨大的影响,同时,给社会造成严重经济负担[2]。骨形态发生蛋白4(BMP-4)是TGF-beita家族中的一员。近年来的研究表明BMP4与神经系统的修复有着密切的关联[3]。研究人员通过免疫组化法发现在整个中枢神经系统的星形胶质细胞、灰质的神经纤维、多巴胺能神经元、去甲肾上腺素能神经元中均观察到BMP4表达,说明BMP4在中枢神经系统发育过程中具有重要作用[4]。黄连素又名小檗碱属于活性生物碱的一种,是从植物中提取的。研究表明,黄连素有抗菌、抗氧化等诸多的药理作用,该药物能够对临床常见疾病有一定治疗效果。既往研究表明,黄连素可减轻SCI小鼠脊髓组织中神经细胞凋亡,这可能与其抑制线粒体氧化损伤,减少Cyt C释放,降低凋亡蛋白表达有关[5-6]。近年来,黄连素在神经系统疾病中的作用日益被重视,但临床中尚未见黄连素对脊髓损伤大鼠体内BMP4表达水平影响的报道[7-8]。因此,本研究探究黄连素(BBR)对脊髓损伤大鼠HE病理、BMP-4 mRNA表达及神经元活性的影响。
1 材料与方法
1.1 动物与分组 在广东省医学SD大鼠中心购买30只雄性SD大鼠,体重224~292 g,鼠龄接近。将所购买的大鼠随机分为脊髓损伤组(S组):该组大鼠制作脊髓损伤大鼠模型;健康对照组(H组):该组大鼠在脊椎做切口后不做任何处理;黄连素组(B组):该组大鼠制作脊髓损伤模型后给予黄连素,每组10只。
1.2 模型制备 采用脊髓钳夹损伤建立模型,大鼠禁食12 h后,使用1%的戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉后,大鼠俯卧位固定于37℃恒温板上。备皮后消毒铺单,以T8~10棘突为中心做纵向切口,长约3 cm。剥离皮下组织,暴露T8~10棘突及两侧椎板。剪开T9~10的棘间韧带和黄韧带,咬除T9椎板,暴露T9平面脊髓。使用特制的平头镊(尖端为宽5 mm平面,中间有1.2 mm填充物,夹持后留有1.2 mm空隙)从两边加持脊髓,夹持时间为15 s。生理盐水冲洗止血。造模完成后,维持大鼠正常生命,正常进食、饮水,并按摩大鼠腹部,协助排尿、排便。同时,给予B组大鼠腹腔注射黄连素治疗 ......
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