赵恒奎,尹亚东,孙中磊,刘英富

    (1.枣庄矿业集团滕南医院 外三科，山东 济宁 277606；2.枣庄矿业集团中心医院 神经外科，山东 枣庄 277000；3.沧州医学高等专科学校，沧州纳米技术创新中心，河北 沧州 061001)

    胶质瘤是中枢神经系统中常见的恶性脑肿瘤，由于其高侵袭性和增殖能力，无论是手术切除还是联合放化疗都不能彻底治愈[1-2]。随着对脑胶质瘤分子机制的深入研究，发现某些特定基因和蛋白质的变化对神经胶质瘤的预后和生物学特性有很大的影响[3]。环指蛋白187(RNF187)，也称为RING域AP-1共激活因子1，是一种包含RING域的泛素E3连接酶[4]。RNF187是生长因子信号的c-Jun共激活剂，对于AP-1在细胞增殖中的功能至关重要[5]。最近的研究表明，泛素连接酶与肝癌、胶质瘤等多种癌症相关[6-7]。泛素化是指翻译后再修饰，调节一系列生物过程，其功能障碍与肿瘤发生有关[8]。Notch1通路在从细胞翻译复制到分化的各种生物学过程中起着基础性的作用，改变Notch1通路不仅会导致多系统发育缺陷，还会导致多种类型的癌症的发生和发展[9-10]。而且，Notch1信号途径促进脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭[11]。因此，本研究推测在脑胶质瘤细胞中RNF187的E3泛素化可能与Notch1通路存在某些联系。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人脑胶质瘤细胞系U251(上海中科院细胞库)；RNF187沉默腺病毒表达载体AAVrh.10 RNF187 siRNA与无表达基因腺病毒衣壳AAVrh.10 Negative(广州云舟生物科技有限公司)；RNF187、Notch1(abcam公司)；MTT、Trizol及去RNA酶试剂(Cayman Chemical公司)；RT-PCR引物(赛默飞世尔科技有限公司)；Tranwell小室、细胞培养板及计数板(康宁公司)；DMEM培养基、胎牛血清、胰酶(Gibco公司)；其它试剂如非特殊说明均由当地试剂商提供 ......