分心木乙醇提取物对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响
结果显示,1材料与方法,2结果,3讨论
白 娜,田丽丽,吴 静,李文婷,张传林(湖北省十堰市太和医院1.感染科;2.心功能科,湖北 十堰 442000)
肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是全球世界范围内常见的恶性肿瘤之一,也是相关癌症中死亡的第三大原因,具有高侵袭、转移和恶化程度差等特点[1-2]。目前,临床上常见的治疗方案有肝切除、肝移植和放疗等,但5年预后效果不甚理想,因此,寻找副作用较小的天然药物具有重要的意义[3]。分心木是胡桃科核桃果核的内质隔膜,质地轻薄,占核桃总质量的4%~5%,具有健脾固肾,利尿清热等功效[4],其化学成分丰富,具有潜在的抗炎、抗氧化和抗肿瘤的作用[5]。有研究表明,分心木不同有机提取物(包括乙醇提取物,DJFEE)明显抑制人肝癌细胞7404、人非小细胞肺癌细胞A549和人结肠癌细胞Hct116、Caco-2的增殖[6],但是关于分心木乙醇提取物对人肝癌细胞Huh7的研究尚无明确报道。Wnt/β-catenin信号通路是多种疾病的关键通路,与多种肿瘤的生长和转移具有密切的联系[7],如丹参酮ⅡA免疫纳米粒通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制肝癌细胞迁移和侵袭[8]。因此,本研究以肝癌细胞Huh7为研究对象,主要探究分心木乙醇提取物可能通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞Huh7增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,旨在为肝癌细胞的研究提供新的方向。
1 材料与方法
1.1 细胞与主要试剂 人肝癌细胞Huh7购自中国科学院上海细胞所;胎牛血清、杜尔贝科改良鹰式培养基(DMEM)、0.25 %胰酶和Transwell小室购自美国Corning公司;Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl购自美国Amresco公司;MTT试剂盒、凋亡试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒和ECL化学发光液购自上海碧云天公司;Matrigel胶购自美国BD公司;PCNA抗体、MMP-9抗体和MMP-14抗体购自美国CST公司;Cleaved caspase3抗体、Bax抗体、Bcl-2抗体、Wnt1抗体、β-catenin抗体和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体购自美国Abcam公司 ......
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