谷敬锋，刘海霞，王桂琦，张 建，邢东洋，马建伟

    (河北医科大学第一医院 外科,河北 石家庄 050011)

    直肠癌是一种强侵袭性且发于肠道的恶性肿瘤，在全球所有类型的癌症中，发病率居第三，死亡率居第二[1]。在我国，预计每年在结肠癌和直肠癌新发现的病例超过38万[2]。因此，寻找治疗直肠癌的新策略具有重要意义。长链非编码RNA(Long noncoding RNAs，lncRNAs)是一类特殊的RNA分子，其长度超过200个核苷酸，但其并无蛋白编码的能力。lncRNAs作为多种疾病的表观遗传调控因子，广泛参与了多种生物学过程[3]，如介导DNA与蛋白质的相互作用、吸附microRNAs以及作为诱饵与蛋白质结合等[4-6]。越来越多的证据表明，正如癌基因影响患者的预后一样[7]，一些lncRNAs也影响癌细胞的发生发展，提示lncRNAs可能成为靶向治疗直肠癌的新途径[8]。文献报道，lncRNA C5orf66-AS1在胃癌[9]、宫颈癌[10]以及口腔鳞癌[11]等多种肿瘤细胞中异常表达，可参与调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等多个生物学过程。本研究通过检测C5orf66-AS1在不同直肠癌细胞株中的表达以及siRNA干扰抑制C5orf66-AS1的表达后观察直肠癌细胞的增殖、凋亡及侵袭过程，并初步探究其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料 直肠癌细胞株SW837、SW1463、HR-8348、COLO741及人正常直肠粘膜上皮细胞(ATCC-0034)均购自美国ATCC中心；胎牛血清、DEME培养基以及0.25%胰蛋白酶购自北京百克赛斯；LipofectamineTM2000转染试剂盒购自美国Thermo Scientific公司；RNA提取试剂盒和实时荧光定量PCR试剂盒均购自北京天根公司；CCK-8细胞增殖试剂盒和Annexin V-FITC/PI试剂盒均购自日本DOJINDO公司；Transwell小室(24孔，孔径8μm)购自美国CONRING公司；基质胶购自美国BD Biocoat公司；一抗β-catenin、PCNA、Vimentin、Caspase-3及GAPDH均购自英国Abcam公司；细胞培养箱、酶标仪及流式细胞仪均购自美国Thermo Scientific(型号：BB150-2TCS、MK3、Life Attune)；荧光定量PCR仪、凝胶成像仪均购自美国BIO-RAD(型号：CFX96、Gel Doc EZ)；倒置荧光显微镜购自日本奥林巴斯公司(型号：IX71)。

    1.2 方法 ......