吴德静，范 芳，陈佳瑜，葛正龙

    (遵义医科大学 基础医学院生物化学与分子生物学教研室，贵州 遵义 563099)

    衰老是一种不可抗拒的自然规律，生物体的衰老发生在机体的各个层面，包括细胞、组织及器官，而细胞是生命的基本组成单位，细胞衰老被认为是人类衰老的基础[1]。

    何首乌苷(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，TSG)是传统中药何首乌的主要活性成分，具有多种生物活性和药用价值，包括抗衰老、抗氧化(通过清除自由基)、抗高胆固醇血症、抗动脉粥样硬化、抗炎、保肝和抗肿瘤作用等[2]。何首乌的抗衰老机制可以通过调节和增强机体的免疫功能，清除衰老动物体内自由基和抗氧化作用来达到抗衰老延年作用[3-4]，但具体分子机制还未明了。Gstm3(谷胱甘肽硫转移酶 M3)是一种 II 期转移酶，有研究指出，Gstm3与许多氧化应激及年龄相关疾病的发病机制有关[5-6]，但在细胞水平上探讨Gstm3在何首乌苷延缓衰老中的作用还未见报道。本研究以SH-SY5Y细胞为研究对象，通过转染Gstm3干扰载体下调Gstm3的表达，进而探讨Gstm3在何首乌苷延缓SH-SY5Y细胞衰老中发挥的作用及可能的机制，为探索何首乌苷延缓衰老的作用靶点提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 人神经母细胞瘤细胞株 SH-SY5Y，购自北纳生物公司。

    1.2 药物与试剂 何首乌苷(成都埃法生物，批号：AF21042756)；胎牛血清(BI，批号：2106043)；DMEM培养基(美国Gibco，批号：8121340、8121308)；Anti-β-Tubulin、Anti-Gstm3 antibody、Anti-Bax antibody、二抗山羊抗兔(武汉三鹰生物技术有限公司，批号分别为：00090708、00047625、50599-2-Ig、20000258)；Anti-Bcl-2 antibody(沈阳万类生物科技有限公司，批号：L12161556)；D-半乳糖、二抗稀释液、RIPA 裂解液、5% BSA 封闭液(北京索莱宝科技有限公司，批号分别为：SLCH96、MB9888-Aug-04F、20201126、20210609)；CCK-8 试剂盒(碧云天生物技术，批号：061521210723)凋亡检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司，批号：KGA1024)；超敏ECL化学发光试剂盒(Millipore,批号：2017801);蛋白Marker(美国Thermo ......