邹 俊，杜逸亭

    (电子科技大学医学院附属妇女儿童医院·成都市妇女儿童中心医院 急诊科，四川 成都 610073)

    炎症是宿主免疫反应的重要适应性机制，通常由细胞损伤和毒素引起[1]。过度和连续的炎症可导致严重的组织损伤，最终对宿主造成严重损害，如肝炎、肺炎、感染性休克和类风湿性关节炎等[2]。正常的炎症反应是自限性的，通过促炎因子的下调和抗炎因子的上调来维持机体的稳态[3]。因此，靶向失调的炎症过程和调节炎症因子是控制炎症性疾病的有效治疗方法。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是一种从茶叶中分离出来的儿茶素单体，具有抗炎的作用[4]。EGCG发挥其抗炎活性的主要方式之一是调节许多信号通路[5-6]，已有研究表明EGCG通过抑制cGAS/Sting/NLRP3通路来降低H2O2诱导的髓核细胞的炎症反应[7]。丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(MAPK/NF-κB)通路是参与炎症反应的重要通路之一[8]，已有研究显示抑制MAPK/NF-κB通路可减轻脂多糖诱导的关节软骨细胞的炎症反应[9]。但EGCG能否通过调控MAPK/NF-κB通路来参与炎症反应尚不清楚。脂多糖(LPS)是一种内毒素，可诱导巨噬细胞产生炎性因子及炎性介质，利用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞以构建炎症细胞模型，是评价药物抗炎活性以及进行机制研究的常用细胞模型之一[10-11]。因此，本研究利用LPS诱导RAW 264.7细胞构建体外细胞炎症模型，观察EGCG对LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应的影响，并探讨其作用机制，以期为EGCG在炎症性疾病中的使用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞来源 RAW 264.7细胞(货号：CM-M056)购自通派(上海)生物科技有限公司。

    1.2 试剂与仪器 EGCG(纯度≥95%)、LPS购自美国Sigm-Aldrich公司；地塞米松(DEX)购自上海亚培生物科技有限公司；MAPK/NF-κB通路激活剂Anisomycin购自美国MedChemExpress公司；MTT检测试剂盒购自武汉默沙克生物科技有限公司；胎牛血清(FBS)、DMEM培养基均购自美国Bio-Rad公司；BCA试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10 ELISA试剂盒均购自上海恒远生物科技有限公司；iNOS、COX-2、p-p38、p-IκBα、p-NF-κB、p38、IκBα、NF-κB、GAPDH兔多克隆抗体(anti-iNOS、anti-COX-2、anti-p-p38、anti-p-IκBα、anti-p-NF-κB、anti-p38、anti-IκBα、anti-NF-κB、anti-GAPDH)、辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗均购自美国CST公司；CO2培养箱购自购自上海润度生物科技有限公司；凝胶成像系统购自南京贝登医疗股份有限公司 ......