阎 晨,刘 涛,宣 斐

    (新疆医科大学附属肿瘤医院 麻醉与围手术期医学中心，新疆 乌鲁木齐 830000)

    随着生命医学和科学技术的进步，越来越多疾病有机会通过全身麻醉后手术进行修复。然而，无论啮齿类还是灵长类动物，多数临床前实验都已证明，全身麻醉会造成认知功能损伤[1]。七氟烷是一种临床常用麻醉剂，其优势包括起效快、效能高、可控性强及血流动力学稳定[2]。回顾性研究分析显示，幼龄儿童接受七氟烷全身麻醉会增加其成年后读写功能损害的风险[3]。此外，在成年患者中，七氟烷麻醉也会造成短期或长期的认知功能损伤[4]。而在老龄患者中，全身麻醉手术则是老年痴呆发病的独立危险因素之一[5]。大脑海马组织是机体认知与学习中心，神经元树突是信息储存记忆的生理基础。α-突触核蛋白(α-synuclein，α-Syn)是广泛存在于海马神经元中突触蛋白，当α-Syn过量表达时会异常聚集，形成神经毒性，造成神经元树突棘可塑性降低，导致学习认知功能降低[6]。现阶段，已有不少研究讨论七氟烷对患者学习认知功能的影响机制[7]，但针对α-Syn介导的树突棘可塑性降低鲜有报道。因此，本研究拟从体内和体外两个方面探讨七氟烷对小鼠树突棘结构与学习记忆功能的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 16只野生型(Wild-type,WT)C57BL/6J 雄性小鼠与16只α-synuclein基因敲除(α-syn knockout,KO)C57BL/6J 雄性小鼠，由南京大学模式动物研究所提供。所有动物体质量为23～28 g，年龄8～10周，饲养于SPF动物房中，室内温度控制23～25 ℃，湿度控制为60%～70%，12 h/12 h昼夜节律。

    1.2 实验试剂与仪器 七氟烷(上海艾伯维公司)；HT22细胞株(上海赛百慷生物技术公司)；高尔基染色试剂盒(美国HitoBiotec公司)；DMEM培养基(美国Gibco公司)；胎牛血清(内蒙古金源康生物公司)；外源性脑源性生长因子(Brain-derived neurotrophic factor，美国Sigma公司)；MTT噻唑蓝粉末(Thiazolyl blue tetrazolium bromide，北京索莱宝生物公司)；Morris水迷宫(北京众实迪创公司)；ZH-MZJ型小动物麻醉机(安徽正华生物仪器公司)；Duo Link 邻位连接检测试剂盒(美国Sigma公司)；兔源Anti-synuclein抗体(美国abcam公司)；鼠源Anti-TrkB(美国abcam公司)；兔源Anti-p-TrkB(沈阳万类生物公司)；兔源Anti-TrkB(沈阳万类生物公司)；鼠源Anti-β-actin(沈阳万类生物公司) ......