王 磊,白艳辉,赵 冬,刘伟明,李 佳，蒋雨光，王秀丽

    (1.河北医科大学第三医院 麻醉科，河北 石家庄 050051；2.保定市第一中心医院 麻醉科,河北 保定 071000；3.保定市第二医院 检验科，河北 保定 071000；4.保定华医中医医院 检验科，河北 保定 071000)

    下肢缺血再灌注是继发肺损伤的主要原因之一[1-2]，其机制可能是缺血缺氧致细胞内的线粒体功能受损，导致细胞肿胀坏死，再灌注过程中氧化应激及炎性反应进一步致组织损伤加重[3-4]。研究发现，线粒体形态功能障碍是肺损伤发生发展的重要标志[5-6]，SIRT3位于线粒体内，参与线粒体的多种生物调节：如抗氧化应激、能量合成代谢、细胞裂变融合等。SIRT3过表达可抑制氧化应激，改善器官缺血再灌注损伤[7-8]。FoxO3a作为SIRT3的下游转录因子，生理状态下广泛存在心、肺、肝、肾、神经系统中，参与细胞内多种生化代谢调控[9]。其转录活性受到乙酰化修饰的调节，在氧化应激刺激下SIRT3使FoxO3a去乙酰化作用增强，降低其转录活性，从而增强抗氧化能力[10]。通过调节SIRT3/ FoxO3a信号通路可降低氧化应激反应，减轻肝缺血再灌注所致的器官损伤[11]。三叶苷是多穗柯叶的主要提取物，且有抗炎、抗氧化等功效[12-13]，作为SIRT3激动剂[14]，可通过上调SIRT3缓解脑缺血再灌注所致的神经损伤。但三叶苷是否能通过调节SIRT3/FoxO3a通路改善下肢缺血再灌注继发的肺损伤尚不清楚，因此本研究以SIRT3/FoxO3a通路为切入点，探讨三叶苷预处理对下肢缺血再灌注继发肺损伤的保护作用及可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和实验动物 MDA、SOD、GSH-Px试剂盒购自上海碧云天公司；I抗SIRT3、I抗FoxO3a购自美国Abcam公司；8～10周龄雄性C57BL6小鼠由中国医学科学院放射医学研究所提供。

    1.2 方法 将50只小鼠[体重(30±2) g]采用数字表法随机分为5组，每组10只 ......