巴西苏木素对骨关节炎模型中软骨保护作用及内质网应激通路变化的实验研究
诱导,1材料与方法,2结果,3讨论
黄 滔,瓦庆德,何兴川(1.遵义医科大学附属医院 关节外科,贵州 遵义 563099;2.遵义医科大学第二附属医院 骨科,贵州 遵义 563000)
骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种以关节软骨退化、关节疼痛、滑膜炎为主要表现的慢性退行性疾病,是世界上最常见并致残的疾病之一[1-2]。软骨细胞是关节软骨中唯一的细胞类型,其生物学变化与OA的发生发展密切相关[3]。研究表明,氧化应激是导致骨关节炎的重要因素之一,过度的氧化应激最终会导致软骨细胞凋亡及分化,氧化应激过程中过度的反应性氧化物(Reactive oxidative species,ROS)积累将引发未折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR),最终激活内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)途径,诱导软骨细胞凋亡[4-5],因此OA中软骨细胞凋亡与ERS密切相关。
临床中OA的治疗以基础治疗配合药物治疗为首选方案,主要是改善患者的疼痛症状、抗炎等。如乙酰氨基酚、布洛芬等被作为OA疼痛的一线治疗药物,但这类药物不能从根本解决软骨损伤修复和炎症问题,且长期用药的毒副作用和耐药也是不可避免的[6-7]。巴西苏木素(Brazilin)是苏木的主要活性成分,研究表明Brazilin具有软骨保护和抗炎活性,是用于OA治疗中一种很有前景的预防性药物[8],其中炎症反应的调控与ERS密切相关[9]。因此本研究探讨的Brazilin是否通过ERS通路来参与OA中软骨细胞损伤修复和炎症的发生过程,具有重要的临床价值。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 巴西苏木素(纯度≥98%)、胶原酶Ⅱ、CCK8试剂盒、甲苯胺蓝染色液、0.25%胰蛋白酶、BCA法蛋白定量试剂盒均购自北京索莱宝公司;Recombinant Rat IL-1购自MCE公司;胎牛血清购自AusGene公司;DMEM高糖培养基购自Gibco公司;GRP78、CHOP、MMP13、β-actin抗体均购自ProteinTech公司;Collagen Type Ⅱ抗体购自杭州华安公司;qRT-PCR相关试剂购自TAKARA公司;引物购自上海生工公司;ECL发光剂购自Tanon公司 ......
您现在查看是摘要页,全文长 8855 字符。