柴胡总皂苷的大鼠体内代谢特征谱研究
柴胡皂苷,乙酰,1材料与方法,2结果,3讨论
王雅芝,王晓宁,张 艳,段灿灿,张建永(1.遵义医科大学 药学院药物分析学教研室,贵州 遵义 563099;2.遵义医科大学 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室,贵州 遵义 563099)
柴胡为传统中药,《中国药典》2020年版规定其为伞形科植物柴胡(北柴胡)BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡(南柴胡)Bupleurumscorzonerifoliumwilld.的干燥根,具有疏散退热,疏肝解郁,升举阳气等功效[1]。研究发现,柴胡中主要含有皂苷、黄酮、挥发油及多糖等化学成分[2-3],其中,柴胡皂苷是柴胡的主要活性成分群,是柴胡质量评价和控制的主要指标性成分[4]。现代药理学发现,柴胡及柴胡皂苷类成分具有解热、抗炎、抗肿瘤、保肝、免疫调节等生物活性[2-3,5]。目前现有含柴胡的成方制剂549个[6],如小柴胡颗粒、柴胡舒肝丸、小柴胡泡腾片等[7],这些成方制剂的主要给药方式为口服,探索其成分在体内的吸收情况,对于揭示柴胡皂苷类成分发挥药效的物质基础很有必要。
肠道是口服药物的主要吸收部位,有文献报道柴胡皂苷在酸碱环境、肠道菌群代谢等条件下极易水解,造成其生物利用度较低[8-11]。由此推测,柴胡皂苷类成分发挥药效的关键成分可能为原型化合物和肠道代谢产物。因此,本实验以柴胡总皂苷提取物为研究对象,运用UPLC-MS/MS技术,通过比较大鼠肠吸收成分、肠代谢的入血成分和肝代谢的血中成分的化学成分特征谱,分析其体内发挥药效的关键成分,为深入研究柴胡的药效物质提供新的依据。
1 材料与方法
1.1 仪器 Thermo QE Orbitrap高分辨质谱仪;Thermo UltiMate 3000超高效液相色谱仪(美国Thermo Fisher公司);离体肠灌流装置、数控恒温循环水槽(上海奥尔科特生物科技有限公司);超声仪(昆山舒美超声仪器有限公司);高速离心机(德国 Eppendorf 公司);多管涡旋振荡器(上海净心实业发展有限公司);电子天平(波兰 RADWAG 公司);混合氧气瓶(贵州望江气体有限公司)。
1.2 药材和试剂 柴胡药材由山西振东道地药材公司提供,经山西医科大学高建平教授鉴定为伞形科植物柴胡(北柴胡)BupleurumchinenseDC.的干燥根,晾干后粉碎,保存于阴凉干燥处。
乙腈(色谱纯,默克化工技术(上海)有限公司);甲醇(色谱纯,上海麦克林生化科技有限公司);甲酸(LC/MS,美国Fisher scientific公司);水(杭州娃哈哈集团有限公司) ......
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