秦桂芳,李 刚,张 凤,鲜小菊,匡菊香,朱 蕾,肖世基,李思慧,刘 超,王 刚

    (遵义医科大学 药学院,贵州 遵义 563099)

    苦丁茶最早记于东汉,距今已有近2000多年的历史,因其资源丰富、价格低廉,已成为我国一种常见的天然饮品[1],其种类主要包括大叶冬青和小叶苦丁茶。本研究所使用的苦丁茶为贵州余庆小叶苦丁茶。小叶苦丁茶是木犀科女贞属植物粗壮女贞(Ligustrumrobustum)的叶,是我国传统的植物代用茶和药食同源植物,主要分布于我国贵州、云南、四川等地[2]。现代药理研究表明,小叶苦丁茶有抗氧化、抗炎、抗衰老、降低血压等作用[3-6]。另外,小叶苦丁茶中含有矿物质、维生素、氨基酸等多种营养成分[7],近年来,越来越多学者关注到了小叶苦丁茶中的活性物质,有望将其开发成为保健药品和食品加工的重要原料。

    植物多糖是一种通过醛糖或酮糖键连接的天然高分子聚合物,其来源广泛、药理活性多样、毒副作用小,在肿瘤生长、病毒繁殖、氧化平衡和免疫系统调节中起着重要作用[8-11]。植物多糖提取方法较多,包括酶辅助提取、热回流提取、超声波提取、超音波提取、微波提取等方法。常规提取方法是热回流提取[12],这种方法对温度要求较高且比较耗时,会引起多糖降解并降低药理活性[13]。因此,在选择植物多糖合适的提取方法时,需同时考虑多糖的生物活性和提取率这2个重要参数。超声提取法是一种通过超声的空化作用、热作用和机械作用的相互作用破坏植物细胞,使药材中的有效成分快速溶出的方法。研究发现,超声提取法较传统提取方法在提取速度及提取效率方面有所提升[14-15]。孙永杰等[16]采用3种不同的方法提取淫羊藿的多糖,结果表明,超声法(4.5 %)较微波法(3.01 %)和水酶法(2.62 %)提取率更高。

    小叶苦丁茶中含有多酚、黄酮、萜类、多糖等多种有效成分[17-18]。目前,关于小叶苦丁茶的研究主要集中在苯乙醇苷类化合物。有研究表明,小叶苦丁茶中分离出的苯乙醇苷类化合物可显著抑制肝微粒体脂质过氧化产物MDA生成[19]。关于小叶苦丁茶多糖抗氧化活性的研究甚少,鉴于此,本研究在确定了对多糖提取率影响较大的几个因素后,采用响应面优化设计确定水提多糖的最佳提取工艺,并通过自由基清除实验考察小叶苦丁茶多糖的抗氧化活性,为小叶苦丁茶后续在食品及医药领域的开发利用奠定理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 余庆小叶苦丁茶(贵州省余庆县绿野茶叶加工厂);葡萄糖(天津市科密欧化学试剂有限公司);苯酚、无水乙醇(成都市科隆化学品有限公司);浓硫酸[重庆川东化工(集团)有限公司];维生素C(成都瑞芬思生物技术有限公司);1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、磷酸氢二钠(上海阿拉丁生化科技股份有限公司);槲皮素(上海麦克林生化科技有限公司);磷酸二氢钠、菲洛嗪(百灵威科技有限公司); FeCl2· 4H2O(国药集团化学试剂有限公司);ABTS(上海碧云天生物技术有限公司) ......