熊丽娟,何 清,袁晓艳,张 艳,张建永,余 明

    (遵义医科大学 药学院,贵州 遵义 563099)

    斑蝥为芫青科昆虫南方大斑蝥(mylabris phalerata pallas)或黄黑小斑蝥(mylabris cichorii linnaeus)的干燥体。已被证明具有明确的抗癌疗效,是我国发现最早的具有抗肿瘤作用的传统中药之一,入药始载于《神农本草经》,具有破血逐瘀、散结消癥、攻毒蚀疮之功,药用历史可以追溯到公元前1世纪[1]。斑蝥素(cantharidin)是一种单萜烯类化合物(图1),为斑蝥中主要活性成分。现有临床研究表明,斑蝥素及其衍生物具有良好的抗肝癌作用,同时可增加机体免疫力,已被开发成上市药物,围绕其开发的衍生药物斑蝥素酸钠等抗肝癌效果也较好[2-4]。然而斑蝥素抗肝癌作用的药效机制、分子靶点至今尚不明确,大大限制其在临床的使用。目前,针对斑蝥素及其衍生物的抗肝癌作用机制的研究主要集中在蛋白相关性的研究,包括阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、抑制癌细胞迁移、诱导自噬和内质网应激等[5-7],未能深入和确切地揭示斑蝥素发挥抗肝癌作用与增强机体免疫力的作用机制。斑蝥素分子直接作用靶点的探明可能是揭示斑蝥素发挥抗肝癌作用的关键突破口,获取并且鉴定斑蝥素的分子作用靶点将有助于深入了解斑蝥素与肝肿瘤细胞增殖、转移、凋亡的相关机制,进而阐释斑蝥素抗肝癌的分子作用机理,从而为斑蝥素的临床安全使用提供依据。虽然目前有大量报道阐明蛋白磷酸2A(PP2A)是斑蝥素抗肝癌潜在作用靶点[8-9],但也有大量研究发现,斑蝥素作为PP2A抑制剂,在PP2A过表达的SMMC-7721细胞中仍有显著的肿瘤抑制作用[10],故PP2A有可能并非斑蝥素的唯一分子作用靶点,因此有必要开展斑蝥素抗肝癌靶点的鉴定研究。

    图1 斑蝥素

    分子靶点“钩钓”技术是目前应用十分广泛的药物分子靶点识别方法[11]。分子靶点“钩钓”技术基于蛋白质可与药物分子发生特异性结合的原理,将药物分子通过化学反应连接到固相微球表面的功能基上,进而将靶点蛋白捕获并富集到固相微球表面,使之得以分离、纯化和鉴定的一种靶点鉴定方法[12]。其中固相载体材料通过共价键合药物而有效实现药物与靶点蛋白的富集,目前基于该技术,人们已经成功地捕获了一些药物的直接作用靶点,并基于此靶点阐明该药物的分子作用机制 ......