吴秀丽,徐 琴,胡 爽,刘 相,谌 芬,彭亚军

    (湖南中医药大学第一附属医院 肾内科,湖南 长沙 410007)

    糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropath, DPN)发病率约占糖尿病所致慢性并发症的50%,可引起患者周围神经系统的广泛损伤[1]。目前研究表明[2-3],高糖环境下氧化应激所诱导的内质网应激反应(endoplasmic reticulum stress, ERS)能够进一步介导神经元凋亡和神经组织损伤,导致DPN发病。其中蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)的活化可直接诱发蛋白质合成抑制,长时间的蛋白合成抑制则通过一些致凋亡基因如CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein, CHOP)的表达活化ERS凋亡途径的发生,与DPN的发生密切相关[4]。枸杞多糖是从传统药材枸杞中提取的主要药效成分,具有降血糖、抑制凋亡和抗氧化等药理作用,对糖尿病及其相关并发症具有良好的改善效果[5]。有研究表明[6],枸杞多糖可通过抗氧化途径保护DPN大鼠周围神经功能,然而其神经保护作用是否与ERS信号通路相关尚不明晰。本研究在此基础上,观察枸杞多糖对DPN模型大鼠神经损伤的治疗作用,以及枸杞多糖通过调节PERK-CHOP介导的ERS凋亡途径改善DPN的潜在机制,为枸杞多糖的进一步开发提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 雄性SD大鼠共50只,SPF级,体质量180～220 g,由湖南中医药大学第一附属医院提供,动物使用许可证号:SYXK(湘)2020-0010。饲养于SPF级实验动物房中,室内12 h光照与黑暗交替。

    1.2 实验药物及试剂 枸杞多糖(500 mg)购自上海源叶生物科技有限公司,纯度为98%,为茄科植物宁夏枸杞(lyciumbarbarumL.)果实的提取物;链脲佐菌素(STZ)购自美国 Sigma 公司、α-硫辛酸购自美国Puritan’s Pride公司;PERK、CHOP、磷酸化PERK(p-PERK)、葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein 78, GRP78)、B细胞淋巴瘤2(b-cell lymphoma-2, BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(recombinant Bcl-2 associated X protein, BAX)一抗购自美国CST公司;Trizol总RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒购自购自日本TaKaRa公司 ......