杨舒蕾,雷晓露,刘晓红

    (1.河南科技职业大学 生理学教研室,河南 周口 466000;2.遵义医科大学 生理学教研室,贵州 遵义 563099)

    神经病理性疼痛涉及神经元正常电活动的改变,其主要的电生理学特点是神经元放电异常增加,超极化激活环核苷酸门控阳离子(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels,HCN)通道属孔隙环离子通道超家族成员,在哺乳动物中,HCN通道家族包括4个成员(HCN1、2、3、4),激活时产生的内向Ih电流导致细胞膜去极化,兴奋性增高。近年研究表明HCN通道与神经病理性疼痛的发生密切相关,HCN通道广泛分布于伤害性感觉传导通路,其表达和功能的变化可促进病理疼痛的产生[1]。脊髓是痛觉信号调制的关键部位,研究发现HCN通道表达于脊髓背角, HCN1和HCN2存在于初级传入神经中枢端[2-3];HCN4选择性表达于背角抑制性中间神经元,但在脊髓背角中未检测到HCN3的表达[4]。最近,Hu等[5]进行大鼠脊髓薄片全细胞膜片钳记录时发现,58%的脊髓胶状质抑制性中间神经元可记录到Ih电流。然而,HCN通道是如何影响脊髓背角神经元兴奋性并参与病理痛的调节,目前相关研究证据尚不充分。

    细胞外ATP是一种重要的疼痛信号物质,其受体分为离子通道型P2X受体和G蛋白藕联型P2Y受体。其中,P2X(P2X1-7)受体是一种非选择性阳离子通道,激活时允许Na+、K+和Ca2+通过,其中对Ca2+的通透性最大。P2X受体广泛分布于各级感觉神经元,与伤害性信息的传递和整合密切相关[6]。形态学及分子生物学实验表明,多种P2X受体表达于脊髓背角,其中P2X1和P2X3主要分布于初级传入神经中枢端;P2X4和P2X7选择性表达于小胶质细胞;而P2X2、P2X5和P2X6表达于脊髓背角神经元[7-8]。脊髓背角神经元P2X受体的功能是否受到HCN通道影响尚不清楚。本实验通过观察HCN通道拮抗剂ZD7288对培养的脊髓背角神经元P2X受体激活诱发的[Ca2+]i的影响,以探讨HCN通道对P2X受体功能的调节作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 实验研究动物SD成年健康大鼠所生的1～3 d乳鼠由重庆第三军医大学实验动物中心提供[许可证号SCXK(渝) 2007-0005],动物实验伦理审批编号为ZMU21-2210-008,大鼠在合适的温度、湿度环境(干燥通风、自由饮食、昼夜光线变换)中饲养 ......