贾 楠,肖 飞,周 娟,伏 瑾,黄小兰,陈 敏,黄 辉,王 毅

    (1.首都儿科研究所 实验中心,北京 100020 ;2.首都儿科研究所附属儿童医院 感染科,北京 100020)

    乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)是导致乙型肝炎的重要病原体,可在分娩时通过母婴垂直传播感染新生儿,或通过接触感染的血液或体液导致家庭内传播。HBV感染可引起急性或慢性肝脏损伤,严重者可导致肝功能衰竭、肝硬化、肝癌等。据世界卫生组织(world health organization, WHO)统计,截至2019年,全球约有2.96亿人曾感染过HBV,约82万人死于乙型肝炎引起的并发症[1]。我国是HBV感染的高负担国家,国家卫健委疾控局发布的《2021年全国法定传染病疫情概况》显示,病毒性肝炎(乙型肝炎约占80%)依然是中国法定报告传染病中报告病例数第一的乙类传染病[2]。HBV感染是严重的全球性公共卫生问题之一,然而,全球仅有10%的感染者接受过HBV检测诊断,知晓自己的感染状况[1],我国也仅有18%的乙肝患者被诊断。因此,建立快速、准确、灵敏、特异的HBV检测方法对加快HBV感染诊断具有重要意义。

    目前针对HBV的检测方法主要有两类[3],一类是基于酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、化学发光免疫分析(chemiluminescence analysis, CLIA)技术以及胶体金法等对血清中HBV相关抗原抗体的检测[4-5],另一类是基于聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)对HBV DNA的检测[6]。ELISA方法是临床上应用最广泛的检测HBV感染方法,但由于HBV感染还存在窗口期感染、隐匿性感染、抗原表位突变、血清学转换等情况,该方法在这些异常情况下灵敏度较低,无法有效检出HBV[7]。基于PCR方法检测HBV具有灵敏、快速的特点,能够有效缩短血清转换前的检测窗口期,从而提高隐匿性HBV感染的检出率[8],但此类方法多需要昂贵的仪器设备、技术熟练的操作人员以及较好的实验条件,且结果判定方法较为复杂,因而很难在经济落后的地区推广应用。因此,建立高灵敏度、低成本、简单快速准确的HBV诊断技术对HBV感染的预防和早期发现具有重要作用。多交叉置换扩增(multiple cross-displacement amplification, MCDA)是一种新型的恒温核酸扩增技术,具有较高的检测灵敏度,目前已用于多种病原体的检测[9-11] ......