刘婷婷,黄志豪,杨红霞,张建勇

    (1.遵义医科大学附属医院 呼吸与危重症医学科,贵州 遵义 563099;2.四川省自贡市第一人民医院 感染科,四川 自贡 683000)

    支气管哮喘(bronchial asthma)简称哮喘,是一种以慢性气道炎症为特征的异质性疾病[1]。目前认为气道炎症是哮喘发病的主要机制,但气道炎症的确切发病机制并未完全阐明。研究表明,包括气道炎症在内的多种因素可导致气道黏液高分泌,引起气道黏液栓形成,阻塞气道,是致死性哮喘发生的重要因素和评估哮喘病情严重程度的独立危险因素[2-3]。水飞蓟宾是从水飞蓟中提取的一种天然类黄酮物质,研究表明其具有较强的抗炎活性[4]。本研究观察不同浓度水飞蓟宾对气道黏蛋白Muc5ac表达水平的影响,探讨水飞蓟宾对哮喘气道黏液高分泌的影响及其机制,为哮喘的治疗探索新的途径。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 SPF级6～8周龄雌性BALB/c 小鼠40只,购自湖南斯莱克实验动物有限公司[SCXK(湘)2019-0004]。动物饲养及实验方案经遵义医科大学附属医院动物伦理委员会批准[NO:KLLY(A)-2020-076]。建模前,所有小鼠适应性喂养 1 周。

    1.1.2 主要药品、试剂 鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)、水飞蓟宾(Silybin,美国Sigma公司);氢氧化铝凝胶(英国Invitrogen公司);小鼠IL-6、TNF-α ELISA试剂盒(中国依科赛生物公司);阿利新蓝-过碘酸雪夫(alcian blue/periodic acid schiff,AB-PAS)染色试剂盒、Masson染色试剂盒(北京索来宝生物科技有限公司);鼠抗细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phospho-extracellular regulated protein kinases,pERK)、转录因子SP1(transcription factor SP1)单克隆抗体(中国艾菲生物公司);鼠抗Muc5ac单克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司);辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)(中国博士德公司);二步法免疫组化检测试剂盒、二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)显色试剂盒(北京中杉生物技术有限公司) ......