马金花,黄 佩,吴柳松,罗南都,何志旭,陈 艳,4

    (1.遵义医科大学附属医院 小儿内科,贵州 遵义 563003;2.贵州省儿童医院 小儿内科,贵州 遵义 563003;3.遵义医科大学 组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心,贵州 遵义 563003;4.贵州茅台医院,贵州 仁怀 564500)

    地中海贫血(thalassemia)是一种由基因缺陷导致人体珠蛋白(α和/或β-珠蛋白)合成受阻,从而引起贫血或临床病理状态的一种遗传性溶血性贫血疾病,通常分为α地贫和β地贫[1-2]。据统计,全世界每年有70 000名各种类型的地贫儿童出生[3],我国是地贫的高发国家,在南方地区发病率为9.70%～50.15%不等[4]。重型患者需长期输血及去铁治疗,目前唯一能根治的方法是行造血干细胞移植[5],但是价格较昂贵,且配型及移植后并发症等问题限制了其广泛应用,给患者家庭及全社会带来巨大的经济和心理负担[6]。对地贫高危人群进行基因诊断,为育龄期的地贫患者或携带者提供适合的生育指导,以及对高风险夫妇的胎儿进行产前诊断及遗传咨询以避免重型地贫患儿的出生,是国内外公认的首选预防措施[7-8]。

    既往地贫诊断的策略是先在人群中进行血常规及血红蛋白电泳检查,随后对上述两项出现异常者再进行基因检查以明确[9]。但血常规及血红蛋白电泳检查不能明确基因类型,常规的地贫基因筛查试剂盒仅能检出有限的地贫基因类型,无法检测出未知的突变,因此存在一定的漏诊及误诊[7, 10]。近年来诞生了第三代测序(third-generation sequencing,TGS)技术,该方法的特点为单分子测序(single molecule sequencing,SMS)和实时测序[11],在特定序列的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测、稀有突变及其频率测定中具有优势[1],得到了越来越广泛的应用。因此,为探讨三代测序在地贫诊断中的应用,本研究选取200例可疑地贫者进一步行三代测序明确地贫的基因型、构成比及分布等,为地贫的诊断及治疗提供理论依据。

    1 对象与方法

    1.1 对象及诊断标准 选取200例疑似地贫且血样本符合检测要求的我院门诊患者进行研究。查血常规及血红蛋白电泳进行初筛,依据初筛结果分为初筛阳性组和初筛阴性组,然后进一步行第三代测序检测。地中海贫血的诊断参考《α-地中海贫血的临床实践指南》及《β-地中海贫血的临床实践指南》中的标准[12-13]。本研究通过遵义医科大学附属医院生物医学研究伦理委员会审查(伦理审查批件号：KLL-2023-532) ......